Гістохімічні та електронно-мікроскопічне дослідження нематод

З огляду на маловивчені питання, метою даної роботи з’явилися гістохімічні та електронно-мікроскопічні дослідження нематод.

У дослідах використовували самок Ascaridia galli, витягнутих з кишечнику курчат-бройлерів. Для гістологічних і цитохімічних досліджень проби обробляли загальноприйнятими методами. Електронно-мікроскопічні дослідження проводили загальноприйнятими і модифікованими нами методами підготовки препаратів для світлової, скануючої і просвічується електронної мікроскопії. Об'єкти досліджували в світловому мікроскопі «Біола-3», електронному мікроскопі «Hitachi-800» з скануючої приставкою «Hitachi-8010» при прискорювальній напрузі 75 кВ і інструментальному збільшенні 1−300 тисяч. Зразки, призначені для дослідження в скануючому електронному мікроскопі, напилюють золотом на установці «Е-102» .

При гістологічному дослідженні структури тканин гельмінтів класу Nematoda встановлено, що самки Ascaridia galliімеют типову структуру, відповідно до видовим описом визначників гельмінтів. Так, у гельмінтів, забарвлених гематоксиліном та еозином, виявлялися: Кутикула, під якою знаходилася гіподерми, вдаються всередину порожнини тіла у вигляді виступів, в проміжках між ними знаходилися м’язові клітини. Нервові стовбури проходили в спинному і черевному виступах. У центрі порожнини виявлялися кишечник і численні зрізи статевих органів: Яєчники і яйцеводи — невеликі округлі освіти і матка, що представляє собою велике округле утворення з великою кількістю яєць в просвіті.

Для з’ясування питань секреції та всмоктування поживних речовин аскаридами проводили гістохімічні дослідження з виявлення ферментів групи карбонових естераз (не специфічної естерази і холінестерази). Вибір цих ферментів для досліджень обумовлений їх фізіологічної значимістю. При виявленні неспецифічної естерази, що бере участь в катаболізмі жирів, методом Гоморі було встановлено, що в кутикули аскариди не виявлялося наявність карбоестеразної активності. Пофарбований продукти реакцій виявлялися більш виразно в гіподермі, що є основним вмістилищем запасного жиру у нематод. У середньому відділі кишечнику аскариди зазначені ферменти виявлялися в апікальних полюсах епітеліоцитів, при цьому продукти кінцевих реакцій розташовувалися дуже щільно, і забарвлення була рівномірного і гомогенної. В області близько ядра естеразна активність була найбільш вираженою, що обумовлено наявністю ендоплазматичної мережі і крапель жиру. На підставі цих даних можна зробити висновок, що неспецифічні естерази просторово пов’язані з відкладеннями жиру.

При виявленні холінестерази за методом Карновського виявлено, що в кутикули аскариди була відсутня холінестеразная активність. Тоді як в соматичній мускулатурі спостерігалася висока активність ензиматичних зазначеного ферменту, яка свідчить про те, що діяльність м’язової системи нематод здійснюється за участю холінергічної механізму.

При цитохімічних дослідженні за допомогою реакції йодної кислоти (ШИК-реакції) у кутикули аскариди виявлялися полісахаридні комплекси, що свідчать про спорідненість з полісахаридами глікокаліксу кишечника.

У дослідах з вивчення поверхневих структур нематод при електронно-мікроскопічному дослідженні самок Ascaridia galli булла гладка кутикула.

В окремих ділянках порушення цілісності кутикули можна було побачити тонкі волокна сполучної тканини гіподерми, вдаються всередину порожнини тіла у вигляді виступів, в проміжках між волокнами знаходилися м’язові клітини.

На підставі власних досліджень і аналізу літератури можна зробити висновок, що у гельмінтів Ascaridia galli спостерігається висока активність ферментів, що обумовлюють діяльність м’язової тканини, в кутикули виявлені полісахридні комплекси, Родинні гліколіксу кишечнику хребетних тварин, при електронно-мікроскопічному дослідженні під гладкою кутикулою виявлені волокна сполучної тканини гіподерми і м’язові клітини. Визначаючи напрям перспектив наукових досліджень в області пізнання біології нематод, слід відзначити необхідність розширення електронно-мікроскопічних досліджень патогенезу та імунітету при гельмінтозах, розкриттю механізму імунних та аутоімунних реакцій, Які виникають в організмі господаря при паразитуванні гельмінтів.

При дослідженні структури тканин гельмінтів класу Nematoda гістохімічними методами встановлено, що самки Ascaridia galliімеют типову для виду структуру, спостерігається висока активність ферментів, що обумовлюють діяльність м’язової тканини, полісахариди кутикули і глікалікса кишечнику хребетних тварин є спорідненими. У скануючому електронному мікроскопі під гладкою кутикулою виявлені волокна сполучної тканини гіподерми і м’язові клітини.