Сравнительная характеристика методів лабораторної діагностики трихомоноза

МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ УКРАИНЫ.

ОДЕСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ їм. И.И.МЕЧНИКОВА.

БІОЛОГІЧНИЙ ФАКУЛЬТЕТ.

Кафедра мікробіології, вирусологии.

ПОРІВНЯЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА ЕФЕКТИВНОСТІ МЕТОДІВ ЛАБОРАТОРНОЇ ДІАГНОСТИКИ ТРИХОМОНОЗА.

Кваліфікаційна робота бакалавра.

студента курсу заочного отделения.

БОГУША Андрія Николаевича.

Науковий керівник кандидат біології, доцент.

Панченко Микола Никитович Допущена до захисту Захищена на засіданні ДЕК «____"_________2004р. «____"__________2004р. Протокол засідання з оцінкою_________________ кафедри №____________ Протокол №____________ Завідуючий кафедри Секретар ДЕК_____________.

______________________.

ОДЕССА-2004.

СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ…3 1. ОБЗОР ЛІТЕРАТУРИ …5 1.1.Систематика й біологічні особливості трихомононад…5 1.1.2. Метаболізм T. vaginalis…7 1.1.3. Культуральні властивості трихомонад…8 1.2. Стійкість фізичних, хімічним чинникам й у зовнішньої среде…8.

1.2.1. Умови інфікування трихомонадами…9 1.3. Механізми патогенезу урогенитальной інфекції трихомонадной этиологии…10 1.3.1. Клініка трихомоноза у мужчин…12 1.3.2. Клініка трихомоноза у женщин…14 1.4. Методи діагностики трихомоноза…15 1.4.1. Мікроскопія нативных і забарвлених препаратов…16 1.4.1.1. Метод смывов…16 1.4.1.2. Мікроскопія нативных препаратов…17 1.4.1.3. Мікроскопія забарвлених препаратов…18 1.4.2.Культуральное исследование…21 1.4.3.Иммунологическиеметоды…22 1.4.4.Методы генної діагностики T. vaginalis…23 1.5.Лечение трихомоноза…24 2. МАТЕРИАЛЫ І МЕТОДИ ИССЛЕДОВАНИЙ…25 2.1. Дослідження культуральним методом…25 2.2 Дослідження методом мікроскопії мазка…26 2.3. Дослідження методом ПЦР…27 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ДОСЛІДЖЕНЬ ТА ЇХНІ ОБСУЖДЕНИЕ…28 3.1.Анализ даних виявлення T. vaginalis жителі Одеського региона…30 ВЫВОДЫ…33 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ…34.

Трихомоноз одна із найбільш поширених захворювань мочеполового тракту і місце хвороб, переданих статевим шляхом. Інфекція має «космополітичний» характер, від неї страждають 170 мільйонів на земній шаре.

Це широко поширене паразитарне захворювання, викликаного Trichomonas vaginalis однаково часто вражаюче, як чоловіків, так і покриток. Урогенитальная трихомонада була вперше описана 1863 року. Паризький лікар Допле виявив їх у виділеннях з піхви хворих жінок Сінгапуру й дав їй назва, яким користуються і з час. Трихомонады виявляються у 10% «здорових» жінок Сінгапуру й у 30% мають явні клінічні прояви. У тропічних країнах цей показник змінюється від 15 до 40% .Оцінки частоти ураженості чоловіків у різних країнах суттєво різняться. Так було в доповіді Наукової групи ВООЗ відзначається, що трихомонады нечасто трапляються причиною не гонококковых уретритів. У Польщі патологія становить близько чотирьох% всіх НГУ чоловіки, у Болгарії - 10%, в країн СНД — від 23 до 47%.

Частота інфікування трихомонозом клінічно здорових жінок на розвинених країн становить 2−10%. У щорічно реєструють приблизно 3 млн. нових випадків захворювання жінок (це приблизно 2,4%). У Росії її 1996 року на 100 тис. населення зареєстровано 399 (0,34%) випадків заболевания[3,8].

Детальну характеристику захворюваності трихомонозом московської популяції в віковій групі від 14 до 59 років чоловіків і жінок дав М.М. Васильєв [9]. Серед хворих трихомонозом і змішаної гонорейно — трихомонадной інфекцією переважна більшість пацієнтів були незамужнем /неодружені розлучені (практично 80%). Зазвичай, вік хворих трихомонозом і змішаної інфекцією жінок коливався не більше 18−39 років, чоловіків — 15- 39 років. Останні дані підтверджують світову практику — хвороба охоплює населення, провідне активну статеву життя. Захворювання протікало з мінімальними клінічними проявами, а й у без них! Тому частіше трихомоноз выявлялся при профілактичних оглядах та притягнення до обстеження статевих партнерів. У цьому трихомонадное носійство виявляли у 40- 50% хворих змішаної урогенитальной инфекцией[4,11,12,28,40].

З огляду на все вище викладене, змінити ситуації у кращому напрямі, можна розробивши політику проведення масового скринінгу. І це, неможливо які мають доступних, точних і надійних методів і коштів експрес діагностики трихомоноза.

Метою справжньої роботи була оцінка ступеня надёжности та ефективності методів лабораторної діагностики трихомоноза. Однак ж аналіз статистичних даних із виявлення трихомонозов, Одеського регіоні за період 1998;2003 годы.

1 ОГЛЯД ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Систематика й біологічні особливості трихомонад.

Збудником захворювання є Trichomonas vaginalis, ставиться до царству вищих протистов — Protozoa, класу жгутиковых — Flagella, сімейству — Trichomonadidae, роду — Trichomonas. У людини існує три виду трихомонад: Trichomonas tenax (elongata), Trichomonas hominis (abdominalis), Tricomonas vaginalis. У ротовій порожнини частіше присутній Trichomonas tenax. При диспепсических розладах, зазвичай в дітей віком виділяють коменсал товстого кишечника — Trichomonas hominis[24,27,31,32].

Збудник має овально — грушоподібну, довгасту, багатокутну інші форми залежно від встречаемых по дорозі перешкод. Розміри трихомонад коливаються від 8 до 40 мкм і більш. Дрібні особини виявляються при гострому, великі при хронічному перебігу процесу. Зовні збудника є тонка оболонка — перипласт, споряджена у передній частини тіла щілиною — цистомой крючкообразной форми, яка виконує функцію рота. Тіло трихомонад складається з тонкозернистой протоплазми з численними вакуолями.

У передній частини тіла паразита розміщено ядро продолговато — овальної форми, круглої чи грушоподібної форми, що містить 5 — 6 ядерець. Поруч із ядром перебуває по кілька тілець як зерен, званих блефоропластом, від якої починається пряма осьова нитку аксонем (аксостиль), що є пружний тяж, на протоплазми по довгою осі і промовець назовні, у вигляді шипа. На передньому кінці тіла трихомонады є чотири вільних джгутика, відведених від блефаропласта. П’ятий жгутик йде тому, приблизно до третини довжини тіла, створюючи край ундулирующей мембрани, сформованою з перипласта.

Завдяки рухам жгутиков і хвилеподібної (ундулирующей) мембрані трихомонады можуть активно переміщатися. Вони можуть утворювати псевдоподии, щоб забезпечити амебовидное рух. Висока пластичність цитоплазми дозволяє трихомонаде впроваджуватися в дуже вузькі проміжки між клітинами. Тому трихомонады можуть існувати в жгутиковой і амебовидной формі, при якої руху жгутиков невеликі. Переміщення збудника відбувається настільки повільно, що він нерухомим. У такий (нерухомій) стадії трихомонады або не мають жгутиков, або притискають їх до тіла, унаслідок чого їх можна рассмотреть.

Электронно — мікроскопічно підтверджено існування круглих нерухомих форм трихомонад, позбавлених ядра і жгутиков. У сечовипускальному каналі чоловіки їх міститься менше, ніж в жінок, і вони малоподвижны.

Харчується трихомонада эндоосмотически і шляхом фагоцитозу. Оптимальна середовище його існування рН 5,2 — 6,2. Саме тому щонайсприятливіші умови для трихомонад створюються після менструації. Трихомонады не утворюють цисти чи за інші форми стійкості які забезпечують їм збереження поза людського организма.

Влагалищная трихомонада є самостійний вид, мови у природничих умовах живе лише у сечостатевому апараті чоловіки й не вражає тварин. Ще замалий вплив місцем проживання Trichomonas vaginalis є піхву, чоловіки — предстательная заліза і насіннєві пузырьки[35,39].

2. Метаболізм T. Vaginalis.

Попри те що, що трихомонады за багатьма характеристиками нагадують еукаріоти, вони різняться з енергетичного метаболізму і мають багато з примітивними анаэробными бактеріями. Трихомонады мають — гидрогеносомы, оточені подвійний мембраною, що є досконалішими аналогами мітохондрій і виконують схожі метаболічні функции.

T. vaginalis демонструє риси, є загальними всім анаэробов щодо вуглеводного й енергетичного метаболізму, що контролюється ферментами, які працюють, як і аеробних, і в анаеробних умовах. Продукти метаболізму включають: ацетат, лактат, малат, глицерол, СО2, а анаеробних умовах — водород.

T.vaginalis — це облигатный паразит, втративши здатність самостійно синтезувати багато макромолекули (пурины, пиримидины, ліпіди), тому найважливіші живильні компоненти трихомонады отримують з вагінального, уретрального секрету при фагоцитоз епітелію і бактеріальних клітин зі складу симбиотической і умовно — патогенної мікрофлори сечостатевих шляхів. Остання обставина диктує необхідність включення до культуральне середовище на шляху зростання T. vaginalis все найважливіші макромолекули, вітаміни і мінерали. Для репродукції трихомонад дуже багато важить сироватка крові, що містить ліпіди, жирні кислоти, амінокислоти і сліди металлов[9,19,22,33,47].

1.1.3 Культуральні властивості трихомонад.

Трихомонады добре зростають у анаеробних умовах, оптимум їх зростання при рН середовища 5,5 — 7,5 і температурі 35 — 37 градусів Цельсія. Культура Trichomonas vaginalis на відміну інших культур трихомонад неспроможна до гемолизу, плазмокоагуляции, добре розкладає глюкозу, мальтозу, крохмаль, слабко — лактозу, не утворює сірководню і индола.

Влагалищную трихомонаду можна культивувати на поживних середовищах, на клітинних культурах і курячих ембріонах. Найбільш придатна середовище для культивування — печёночная середовище з цистеином, пептоном і мальтозой. Культивують від 3 до 5 суток[37,39].

1. Стійкість фізичних, хімічним чинникам й у зовнішньої среде.

Поза організмом людини трихомонада швидко втрачає життєздатність. У перебігу кількох секунд гине від высушивания, при термічній обробці буде в діапазоні до 55 градусів Цельсія вона життєздатність — 30 секунд. На трихомонаду згубно діють прямі стане сонячне проміння. При дослідженні секрету простати, збудник гине (візуально втрачає будь-яку рухливість) за час поки мазок несуть до микроскопу.

Серед хімічних речовин бактерицидно діє розчин ртуті дихлорида (1:1000 — 1:1500), карболової кислоти (1%) і хлорамін Б (1%).

Трихомонада залишається життєздатною за нормальної температури -10 градусів Цельсія до 22−45 хвилин, за нормальної температури 1−4 градуси Цельсія в перебігу 96−114 годин. Збудник також зберігає життєздатність в деяких біологічних рідинах і виділеннях людини. У сперми і сечі трихомонады життєздатні до діб, кілька годин вони виживають у вологому чистому белье[23,39].

1. Умови інфікування трихомонадами.

Джерелом інфекції є хвора людина, чи трихомонадоноситель. У неполовое зараження зустрічається рідко, переважно в дівчаток (через мочалки, нічні горщики, латексные рукавички, медичні інструменти). Це можна тому, що у комочках гною чи слизу урогенитальные трихомонады протягом кількох годин зберігають життєздатність (до засихання субстрату чи до перемішування його із жовтою водою). Водний шлях інфікування відхиляється, хоча допускається можливість зараження жінок за спільної прийомі ванн, зі слабко минерализованной водою, близька до изотоническому розчину. У акушерської практиці часто відбувається інфікування новонароджених від хворих матерей.

Дітям характерна очаговость інфекції. Такими осередками можуть бути сім'я, дитячий колектив. Зараження відбувається за непрямому контакті. Проте за будь-якому шляху передачі джерелом є хвора людина чи носій урогенитальных трихомонад.

Можливість зараження під час статевого акта, перевищує 80%. І цей показник має закономірність пов’язана з тривалістю коїтусу, і із часткою морально гігієнічних аспектов.

Чоловіки з анатомо-фізіологічних особливостей ризику зараження піддаються меншою мірою, ніж жінки. Проте в 60 — 80% мали статеві контакти з хворими трихомонозом жінками паразити виявляються. Жінка, що явилася джерелом зараження чоловіків трихомонозом, збудник виявляється в 100% случаев.

Там, коли статевої акт приміром із використанням бар'єрних чи хімічних методів контрацепції, випадків зараження мало відзначають. Деякі чоловіки після коїтусу практикують метод затримки сечі в уретре (шляхом пережимания крайньої плоті), помилково вважаючи домогтися трихомонацидного ефекту. Проведення часто призводить до того, що трихомонады вражають як уретру, чи дистальные відділи мочеполового тракту чоловіки. Можливість розвитку простатиту у випадках набагато вища, аніж за звичайному перебігу трихомоноза, коли спочатку уражається лише уретра[9,13,14].

2. Механізми патогенезу урогенитальной інфекції трихомонадной этиологии.

Для трихомоноза притаманні чотири чинника патогенезу такі, як: інтенсивність інфекційного впливу, рН — влагалищного та інших секретів, фізіологічне стан епітелію сечостатевої системи, супутня бактеріальна флора.

T.vaginalis виділяє в навколишнє середовище «клітинний роз'єднуючий чинник» розглядається як, з допомогою якого паразит проникає в межклеточное простір і, розпушуючи тканину, сприяє проникненню в субэпителиальные верстви бактерій, що врешті-решт формує осередок воспаления.

T.vaginalis здатна уникати литического дії комплементу і клеточно — опосередкованих реакцій імунної системи хазяїна, що найважливішим аспектом патогенезу заболевания.

Стійкість влагалищных трихомонад до комплементу залежить від високої концентрації у яких іонів заліза, які паразит надміру здатний отримувати з менструальної крові. Відомо, що іони заліза регулюють експресію протеазных білків, що сприяють руйнації С3 — компонента комплементу лежить на поверхні мікроорганізму, й дозволяють паразитові уникати комплемент — залежного лізису. Необхідно враховувати, що піхвові трихомонады, подібно іншим паразитам, секретують высокоимуногенные антигени, які можуть нейтралізувати антитіла чи цитотоксические антигени, які здатні нейтралізувати антитіла чи цитотоксические Т — лімфоцити. З іншого боку, T. vaginalis може сорбировать у своїй поверхні білки плазми (антигенная мімікрія), яка дозволяє імунної системі ідентифікувати паразита, як чужорідний организм.

Отже, показано, що трихомонадная інфекція не призводить до розвитку вираженого імунної системи. Виявлення в хворих чи перехворілих трихомонозом осіб сироваткових і секреторных антитіл є лише свідченням існуючої чи перенесеної інфекції, але з здатністю забезпечити стійкий імунітет. Реинфекция T. vaginalis в людини бракує імунної захисту. Клінічні прояви урогенитального трихомоноза відрізняються більшою розмаїтістю: гострих форм із яскраво вираженими симптомами запалення до замало, й асимптомного течії захворювання. Патогномоничных клінічних (суб'єктивних свідків і об'єктивних) ознак трихомоноза немає, теж виявлено специфічні морфологічні зміни у уражених органах і тканинах. Визначальну роль патогенезі T. vaginalis грає формування різних асоціацій влагалищной трихомонады з патогенними і умовно — патогенними мікроорганізмами урогенитального тракту, і навіть відповідної реакції макроорганизма. Якщо сила відповідної реакції макроорганизма перевищує «агресивність» інфекційного агента, то клініка гострого запалення, зазвичай, не розвивається, а навпаки, слабкий імунна відповідь сприяє реалізації патогенних і вирулентных властивостей возбудителя.

T.vaginalis, потрапляючи в уретру, фіксується на клітинах плоского епітелію слизової оболонки, проникаючи в залози сечівника і лакуни. Потрапивши у сечостатеві органи, вона зумовлює розвиток запалення чи залишається непоміченою. Умерено виражена запальна реакція розвивається за наявності великої кількості паразитов[1,2,3,6,9,13,15].

1.3.1 Клініка трихомоноза у мужчин.

У чоловіків трихомонады можуть вражати уретру, її залози, насіннєві бульбашки, простату, придатки яєчка, куперовы залози, пара уретральные протоки, залози крайньої плоті, сечовий міхур, ниркові лоханки.

Уретрит — найбільш часте поразка. Розрізняють свіжий і хронічний. Перебіг свіжого уретрита частіше подострое і торпидное, рідше гостре. При гострому і подостром перебігу уретрита спостерігаються стрімкі гнійні виділення з уретри, при торпидном перебігу — мізерні, водянисті, слизисто гнійні чи слизові. В окремих хворих виділення пінисті. Суб'єктивні відчуття непостійні і звичайно маловыражены: частий це сверблячка і печіння в сечовипускальному каналі; іноді може постати біль під час сечовипускання. Діуретичних розлади виражені слабо.

Стрімкі виділення при гостру й подострой формах уретрита за 1 — 2 тижня, спонтанно зменшуються, і захворювання малосимптомным. У частини хворих уретрит починається з не різко виражених явищ, але потім поступово посилюється, набуваючи гострий і підгострий характер.

Хронічні уретрити відрізняються млявим течією з періодичним загостренням патологічного процесу. У 63% хворих захворювання характеризується малосимптомностью, мізерними гнійними виділеннями чи слизисто — гнійними виділеннями, у 37% переважають симптоми ускладнень, а уретрит залишається непоміченим больными.

Запальний процес недовго обмежується передній уретрой. Невдовзі розвивається тотальний уретрит. Учащённое сечовипускання, імперативні позиви, біль у кінці сечовипускання, пиурия, терминальная гемотурия спостерігаються лише за гострому перебігу. У торпидных випадках клінічні ознаки заднього уретрита відсутні. Він зазвичай распознаётся по патологічному складу другий порції сечі і даним уретроскопии.

Зміни, виявлені при уретроскопии чоловіки, котрі страждають трихомонозом, мало, чим відрізняються від ендоскопічної картини при гонорейном уретрите.

Простатит, виникає у у 10,6 — 27,8% хворих. Можливо, встановити тільки після взяття секрету железы.

Эпидимит, зустрічається частіше, аніж за гонорею, носить завжди одностороння. У 30% протягом гостре, у 70% спостерігається короткочасний підйом температуры.

Везикулит, супроводжує эпидимиту і простатиту і супроводжується зазвичай суб'єктивними розладами. Везикулиты іноді ведуть гемоспермии. Часто уражаються лакуни — литтеровских желёз, тизониевых желёз і кілька уретральных протоков.

Стриктуры уретри, розвиваються в розмірі 5 — 8,4% випадків вдається виявити лише за уретроскопии, на відтік сечі не влияют.

Цистит, по клінічного перебігу нічим немає від циститов інший етіології. При цистоскопии виявляється дифузна гіперемія слизової трикутника. У сечі, взятій катетером, іноді виявляють трихомонады і бактеріальну флору. Висхідна інфекція верхніх сечових шляхів розвивається дуже редко.

Трихомонады частина хворих вражають шкіру геніталій. Вони частіше розвиваються в жінок. З власного прояву поразки можуть нагадувати шанкриформную пиодермию, первинну сифилому, за іншими випадках утворюються виразки з неправильними подрытыми краями з гнійним нальотом дно якої. Однак понад часті неправильної форми ерозії з яскраво — червоним дном[34,35,38].

2. Клініка трихомоноза у женщин.

Характеризується многоочаговостью поразки. У патологічний процес втягується переважно нижній відділ мочеполового тракту (86%). Висхідний процес розвивається в 14% хворих. Насамперед, в жінок уражаються уретра, піхві та канал шийки матки. Переважає розвиток вульвовагинита.

Вульвит і вестибулит. При гострому перебігу процесу хворі скаржаться на печіння у сфері геніталій, сверблячка і біли. Шкіра великих статевих губ і слизова оболонка передодня стають отечными, гиперемированными і покриваються гнойно-слизистыми сірого кольору виділеннями, ссыхающимися в палітурки, під час видалення яких слизової виявляються ерозії. Під упливом рясних виділень виникає дерматит внутрішній поверхні стегон. За хронічної перебігу захворювання може бути сверблячка і менше стрімкі виділення. При огляді відзначається очагове гіперемія слизової вульвы.

Уретрит. Майже в половини хворих протікає без суб'єктивних відчуттів, в інших — переважно з гострим течією. Є скарги на різь і болючість під час сечовипускання, імперативні позиви на сечовипускання і болючість при залученні в патологічний процес шийки сечового міхура. Під час огляду виявляються гіперемія і отёк губок уретри, пальпаторно встановлюється її інфільтрація. При масажі уретри виділяється крапля гнійного чи гнойнослизового вмісту, де можна знайти трихомонады.

Хронічний уретрит зазвичай протікає асимптомно, супроводжується жалюгідним отделяемым і ущільненням як тяжа уретры.

Нерідко в патологічний процес втягуються парауретральные ходи. Навколо їх усть розвивається гіперемія слизової, а при пальпації можна знайти ущільнення як маленького тяжа чи вузлика. При уретроскопии слизова зазвичай гиперемирована чи бліда, судини погано помітні, складки неравномерны, сглажены.

Бартолинит. Загальні розлади відсутні, біль у області бартолиновой железы.

Вагинит. Найбільш часта форма трихомоноза. При гострому перебігу спостерігаються стрімкі рідкі, гнійні, пінисті біли, що роз'їдають виділення, кількість яких значно менше при хронічному процесі. Слизова піхви дифузно гиперемирована. Іноді захворювання може протікати на кшталт макулёзного, гранулёзного і эрозивного вагинита, а хронічні поразки — нерідко без виражених клінічних симптомов.

Эндоцервицит. Супроводжується гіперемією слизової і отёком шийки матки, великими виділеннями з шеечного каналу, під впливом яких утворюються ерозії, які отримують фолликулярный характер при хронічному перебігу процесу. При стихании запального процесу нерідко залишається трихомонадоносительство.

Висхідний трихомоноз. Виявляється як метроэндометрита (46%), периметрита і аднексита (46%)[20,26,28,39].

1.4 Методи діагностики трихомоноза.

Нині нашій країні за кордоном застосовують чотири лабораторних методу визначення T. vaginalis: мікроскопічний, культуральний, імунологічний і генодиагностический.

Усі методи діагностики трихомоноза чоловіки менш надійні, ніж в жінок, позаяк у отделяемом уретри чоловіки, зазвичай, міститься значно менше збудників, які найчастіше малорухомі. Умови проживання паразитів у чоловічий уретре й у піхву жінок різко різняться. Не може спричинити T. vaginalis, пристосувальні форми, якої в чоловіків і жінок зазвичай різні. Трихомонады у тому відношенні немає багатьох видів мікроорганізмів, фенотип яких змінюється залежно від довкілля і зовнішніх умов. А щоб отримати надійні дані, слід дотримуватись наступних правил:

1. Негативного результату будь-якого дослідження виключає наявність трихомонад; всі види досліджень слід виконувати многократно.

2. Дослідження отриманого матеріалу проводити одночасно усіма методами.

3. Для оцінки використовувати як уретральное отделяемое і секрет передміхурової залози, а й осад свежевыпущенной сечі, секрет бульбоуретральных залоз, спермы[5,22,35].

1.4.1 Мікроскопія нативных і забарвлених препаратов.

Найкращі результати отримують для дослідження не вільно стікаючих виділень, а зіскобів і змивів з уретри, оскільки трихомонады локалізуються переважно у її лакунах і железах.

1.4.1.1 Метод смывов.

Метод змивів дозволяє їм отримати матеріал для нативных препаратів і посівів за мінімальної кількості відокремлюваного. Для цього він на прокипяченную скляну трубку довжиною 12 — 15 див. з оплавленими кінцями надягають гумовий балончик і набирають у ній злегка підігрітий ізотонічний розчин хлориду натрію чи розчин Рінгера — Локка (0,5 — 1 мл). Після відходу вільно стікаючих виділень і легкого масажу уретри в її зовнішнє отвір вставляють трубку. Розчин кілька разів вдувають в уретру і знову засмоктують в трубку. Отже, з нею змішується отделяемое передній частини уретри і вміст залоз і лакун. Змив випускають у флакон з-під пеніциліну, звідки може бути перенести на предметне скло чи засіяти. Центрифугування змивів полегшує пошук трихомонад[9,37,38].

1.4.1.2 Мікроскопія нативных препаратов.

Найбільш доступний і точний метод, оскільки типові трихомонады не можна сплутати іншими мікроорганізмами і клітинами, зустрічаються в сечостатевих органах. Нативний препарат готують методом висячої чи розчавленої капли.

Густе отделяемое розбавляють теплим изотоническим розчином хлориду натрію, щоб полегшити переміщення трихомонад. Активна рухливість, притаманна трихомонадам у влагалищном секреті, выделяемом чоловічої уретри спостерігається рідко. Частіше відзначаються толчкообразные руху або лише коливання жгутиков і ундулирующей мембрани. Препарати розглядають в звичайному мікроскопі зі злегка спущеним і задиафрагмированным конденсором Аббе, у результаті створюється необхідна контрастність. Використовують також конденсоры темного поля і фазово-контрастной микроскопии.

Іноді ще рельєфного виділення трихомонад нативному препарату додають краплю розчину Люголя, флюоресцеина. Припинило рух чи малорухомі трихомонады в нативных препаратах не розпізнаються. Крім того, руху трихомонад швидко припиняються при охолодженні і висиханні препарату, тому мазки необхідно досліджувати відразу після отримання материала[9,14,15,37].

1.4.1.3 Мікроскопія забарвлених препаратов.

Зручно, оскільки вимагає їх негайного вивчення узятих мазків. Вони вдається розрізнити як типові рухливі, а й малорухомі (амебоидные) трихомонады, в нативных ж препаратах виявлення атипичных паразитів, котрі мають, зазвичай, активної рухливістю, дуже затруднительно.

Розроблено різні методи забарвлення. Окремі дозволяють розглянути органоиды паразита, а й через складності їх використовують лише за наукових дослідженнях (наприклад, забарвлення по Гейденгану). Інші методи, більш прості (по Лейшману, по Романовському — Гимзе), зв завжди дозволяють відрізнити жгутики, аксостили і блефанопласты, які є розпізнавальними ознаками трихомонад. Багато хто воліє забарвлення метиленовым синім. Досвід проведення мікроскопії дає змогу стверджувати, що у правильно забарвлених метиленовым синім мазках рухливі (типові) трихомонады мають досить характерний вид. Проте діагностика атипичных (амебоидных) трихомонад більш складна й відповідальна, вимагає більшої обережності і часом залишає місце для сумніви. Саме тому для виявлення атипичных форм слід утриматися від категоричного укладання, що може бути причиною гіпердіагностики. Приготування мазка: виділення завдають на чисте предметне скло і обережно розмазують у ній іншим склом. При грубому размазывании настільки ніжні клітини як трихомонады, легко раздавливаются, що утруднює їхню розпізнавання. При фіксації над полум’ям трихомонады також деформуються. Після паркана матеріалу злегка висушені надворі не фіксовані препарати відразу ж потрапляє офарблюються 1% водним розчином метиленового синього протягом двох — трьох хвилин, та був промивають звичайній водою і висушують на воздухе.

Забарвлені метиленовым синім «типові трихомонады» мають ніжну сітчасту, пінисту цитоплазму світло-блакитного кольору. Інтенсивно забарвлений перипласт чітко окреслює кордону тіла. Щільна темно-синє з фіолетовим відтінком маленьке ядро перебуває звичайно у переднього кінця тіла, рідше у центрі. Вона має форму кісточки сливи чи неправильне форму і перевищує 1/3 довжини тіла. У цитоплазмі містяться вакуолі, найбільші у тому числі розташовуються поблизу ядра. Вони може бути укладено бактерії і харчові частки. У цитоплазмі видно також темні гранули діаметром 0,2 — 1 мкм. Довжина коштує від 12 до 30 мкм і більше. Хоча жгутики та інші органоиды невеликі (зрідка забарвлюється аксостиль), а препарат має однотипну забарвлення, ці особливості дозволяють легко диференціювати трихомонады від клітин епітелію, і навіть лейкоцитів з блідої, рівномірно забарвленою цитоплазмой і круглим чи овальним ядром в центре.

Інакше виглядають атипові, амебоидные трихомонады. Вони різняться по форми і величині, але переважають особини круглої чи овально форми, діаметром 15 — 35 мкм і більше. Кордони тіла чітко обкреслені тонкої, синьої лінією перипласта. Цитоплазма ще більше світла через кількість вакуолей з окремими включениям і зернами, іноді скапливающимися близько ядра. Овальне чи неправильної форми, рідше круглий ядро становлять половину довжини тіла паразита, розташовуючись ексцентрично. Воно забарвлюється менш інтенсивно, але, зазвичай, чітко відокремлена від цитоплазми. У ядрі видно нечисленні глыбки хроматина і світла строма. У вакуолях нерідко помітні захоплені бактерії і клітинні уламки. У цій опису легко відрізнити трихомонады від мононуклеарных лейкоцитів і клітин епітелію. Важко диференціювати амебоидные трихомонады від макрофагів з дегенеративними змінами. Щоправда, такі макрофаги що ніколи невідомі в уретре. Лише за гострому гонококковом запаленні зрідка виявляють макрофаги і двуядерные плазматические клітини. Макрофаги розташовуються скупченнями, кількість їх збільшується на початку періоду одужання, вакуолизация буває за дуже високої вірулентності бактерій, які звичайно інфікують уретру. Трихомонады, зазвичай, поодинокі до поля зору, після одужання зникають, экссудат часто вже не містять мікробів, в них буває великих вакуолей. Ядро макрофага круглий, овальне чи бобовидное, щодо гомогенне: іноді у ньому видно одне чи кілька ядерець, загальна забарвлення його темна. Ядро трихомонады, навпаки, складається з кількох чітко різняться глыбок хроматина, ув’язнених у загальну оболонку з більш світлої стромой.

Підтвердженням те, що вищезазначені клітини є трихомонадами атипової (амебовидной), форми, служать такі факты:

Їх знаходять разом з типовими паразитами, і навіть в тих хворих, які мають рухливість трихомонад відсутня, проте вони були джерелом зараження трихомонозом кількох человек.

1. Вони зникають після противотрихомонадного лікування та профілактики з’являються знову лише за рецидивах і реинфекциях.

2. Метронидазол (трихопол) ефективний під час лікування хворих, у абактериальном отделяемом виявлено такі клетки.

3. За хронічної уретрите і рецидивах типові трихомонады з’являються в хворих, у гострої стадії виявляються лише клетки.

4. Вони відсутні в хворих коїться з іншими формами уретритів, якщо ні змішаної инфекции.

5. Типові трихомонады виявляють в багатьох статевих партнерок осіб, яким діагноз трихомоноза було встановлено виходячи з виявлення цих клеток.

6. При сівбу матеріалу від хворих, які мають виявлено такі клітини, нерідко виростають типові трихомонады.

Становить інтерес та обставина, що типові рухливі трихомонады частіше виявляють при хронічному і торпидном уретрите, нерідко ускладненому хронічним простатитом, тоді як із гострих уретритах виявляють мало паразитів — переважно атипові амебоидные формы[7,10,14,15,19].

1.4.2 Культуральна исследование.

Служить важливим ланкою лабораторної діагностики трихомоноза в чоловіків і жінок, особливо в розпізнаванні атипичных форм паразитів і виявленні їх що в осіб, одержували противотрихомонадные препарати при трихомонадоносительстве. Зрозуміло, посіви необхідно проводити паралельно мікроскопії нативных і забарвлених препаратів і повторювати при негативних результатах.

Суперечлива оцінка культурального методу діагностики трихомоноза пов’язана, насамперед, з допомогою нестандартних поживних середовищ, нерідко які мають низькими якостями. Достатньої чутливістю має середовище СКДС, розроблена У. М. Бедновой. Серед імпортних високим якістю мають також середовища «Diamon», «Kupferberg», «Asani», і навіть тест — система «Трихомоно-Скрин» Дмитрієва .

Метод вирощування трихомонад в бульонной культурі - «золотий стандарт «для діагностики, що це простий в інтерпретації метод і вимагає менш як 300−500 трихомонад/мл инокулюма спершу зростання культурі. Тим щонайменше, йому існують обмеження, властиві культуральним методам. Для діагностики необхідний інкубаційний період від 5 до 7 днів, є занадто довгим через можливість інфікованого пацієнта до поширенню інфекцію. У зв’язку з цим не набула достатнього застосування у клінічній практиці як прямого діагностичного метода.

Заради покращання сприйняття культурального методу, там був розроблений метод пластикового конверта, з допомогою якого виконати як негайну перевірку присутності трихомонады, і зберегти подальше зростання трихомонад лише у самоподдерживающейся системі. Отримані результати можна з такими для дослідження мазка і. Аналогічно пластиковому конверту використовується система «InPouch» як двухкамерного мішка, що дозволяє виконати швидку перевірку культури шляхом мікроскопії через стінку мешка.

Технологія зростання патогена на клітинної культури використовує властивості клітинних ліній відновлювати зростання T. vaginalis з клінічних зразків. Було продемонстровано, що це метод дає кращі результати — щодо культивування в бульйоні і приготування вологій камери, оскільки здатний визначати T. vaginalis в концентраціях менш 3 організмів у 1 мл. Проте культивування у культурі - це простий рутинний метод; він шляхів та незручний для швидкої диагностики[5,9, 14,15,22,29,36,37].

1.4.3 Імунологічні методы.

Обмеження культуральних і мікроскопічних методів виявлення T. vaginalis змусили вчених розвивати альтернативні методи, які можуть опинитися визначати антиген, антитіло чи нуклеїнові кислоти в уретральном чи вагинальном экссудате. Імунологічні методи не набули належного поширення через брак якісних вітчизняних тест-систем. Крім цього, все методи серологической діагностики T. vaginalis мало інформативні, т. до даний антиген бракує 100%-го імунної системи. Хоча на утвердження діагнозу ними можна скористатися. Використовуються різні методи визначення антитіл: аглютинація, непряма гемаглютинация, дифузія в гелі, флюоресценція антитіл і імуноферментний аналіз, метод иммуноблотинга. Певний диагностичическое значення має тут пряме визначення специфічних білків T. vaginalis в биопробах з використанням моноклональних антитіл як швидкого методу діагностики трихомоноза. Прямий імуноферментний і иммунофлюоресцентный аналіз мазків вагінального соскоба (тест-система фірми California Integrated Diagnostics, Benicia, Calif.), використовує перокидазо — і флюорохром — мічені суміші моноклональних антитіл до різним структурам T. vaginalis був такий ж чутливим і специфічним, як і використовуваний культуральний метод. До того ж, результати визначення збудника трихомоноза одержують у протягом однієї години, що дозволяє зробити экспресс-скрининг [10,17,35,41,42].

1.4.4 Методи генної діагностики T.vaginalis.

З початку 1990;х років у лабораторну клінічну практику стали, упровадяться технології визначення видоспецифических нуклеотидних послідовностей областей ДНК (мішеней) бактерій і клітин вищих організмів. Спочатку це був ДНК-гибридизационная технологія. У тестсистемі Affirm VP використовуються синтетичні зонди виявлення як Gardnerella vaginalis, і T. vaginalis вже з вагінального соскоба. Ця методика краще, ніж метод вологій камери. Проте, зустрічалися хибнонегативні результати при її порівнянні з культуральним методом (80% чутливості щодо позитивних зразків у культурі). Один із гибридизационных методик — «дот-блот» гібридизація, у якій використовувався фрагмент 2,3 ДНК T. vaginalis як зонда, могла визначити ДНК T. vaginalis в вагинальном секреті. Проте нестабільність зонда, виконання специфічних технічних прийомів, особливо використання радіоактивної мітки, були великими вадами цієї методики. Коли радіоактивно мічений зонд замінили на флюоресцентно-меченный ДНК-зонд, ця методика відразу знайшла своє застосування при виявленні безсимптомного носительства T. vaginalis. Нова генодиагностическая технологія — ПЛР, в останнім часом випереджає інші методи генодиагностики трихомоноза і які з культуральним методом широко використовують у клінічної практиці. Риу 1999 р. запропонували ПЛР методику ідентифікації ДНК влагалищной трихомонады з праймерами для амплификации повторюваного фрагмента TV-E650. Порівнявши свій метод коїться з іншими використовуваними методиками діагностики: мікроскопією нативного мазка, культуральним, ні з клінічними даними. Він, що запропонований метод ПЛР на 100% чуттєвий і специфічний, т.к. б не давав перекрёстной реакції коїться з іншими найпростішими і Candida albicans. Використана їм методика ПЛР вдвічі частіше виявляла трихомонаду, ніж інші лабораторні методики. Японські учённые як і зуміли підтвердити правомірність встановлення діагнозу «трихомоніаз» в 19-ти випадках в жінок й у тому випадку в чоловіка методом ПЦР[43,44,45,46,48].

5. Лікування трихомоноза.

Препарат вибору — метронидазол, або його аналог. Препарат призначають всередину, внутрішньовенно чи внутривагинально. Ефективність хіміотерапії сягає 80−95%. Останнім часом частіше рекомендується застосовувати комплексну терапію, з допомогою новітніх препаратів, приміром, як-от Наксоджин. Крім цього радять проводити місцеву обробку слабкими дезинфекторами і розчинами, снимающими запалення. Причина даної терапії обумовлена адаптационными механізмами трихомонад. З огляду на чого сьогодні рідкісний лікар володіє методикою ефективного лікування цієї патології [1,2,18,25].

2.МАТЕРИАЛЫ І МЕТОДИ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Усі дослідження з темі кваліфікаційної роботи проводилися з урахуванням одеського обласного шкірно-венерологічного диспансеру, розташованого по адресою: р. Одеса, вул. Воробйова, 5.

У дослідженні, що проходив у період із грудня 2003 року у травень 2004 року, брали участь виключно чоловіка на кількості 150 людина. Пацієнти було обстежено на трихомоноз трьома методами: культуральним, мікроскопії пофарбованого мазка і ПЦР.

Усім обследуемым, на добу до взяття матеріалу здійснювалася внутримышечная ін'єкція пирогенала, в дозі - 50 МПД, згідно з інструкцією наведеної [18]. Унаслідок чого на даний момент аналізу у 60% хворих відзначалися слизові, слизисто — гнійні выделения.

2.1. Дослідження культуральним методом.

Культуральний метод дослідження був у посівах патологічного матеріалу (відокремлюваного уретри) на ИПС, за методикою [21]. Використовувалася живильне середовище виділення влагалищных трихомонад (Э).

Следующего складу, г/л: ферментолизат біомаси мікроорганізмів без оболонок (осветлённый).

14,2 мальтоза.

8,0 хлорид натрия.

6,0 хлорид калия.

0,1 карбонат натрия.

1,2 РН середовища доводився до 6,0 ± 0,2.

Препарат розроблений ЦКВИ, випускається НВО «Живильні среды».

Матеріал виділень і зіскрібок пробираються ложечкою Фолькмана, якщо виділення стрімкі, можна використовувати бактеріологічну петлю, при цьому збільшення відокремлюваного, лівицею виробляється масаж уретри выжимающими приёмами (дистально-проксимальное напрям). При сівбу ложечка Фолькмана з посівним матеріалом опускається у середу до дна пробірки і енергійно круговими рухами змивається. Пробірка у спиртівки закривається ватно-марлевой корком і ставиться на инкубацию при 37 градусах Цельсия.

Облік результатів проводився шляхом мікроскопічного дослідження препаратів через 7 днів після посіву. Осад відбирався пастеровської піпеткою і микроскопировался в темному полі зі збільшенням 280. При позитивному результаті спостерігалися рухомі паразити: одиночні чи скупчення. Усі ліки виглядали нативными.

2.2. Дослідження методом мікроскопії мазка.

Метод мікроскопії мазка грунтується на аналізі соскоба чи виділень, з подальшим забарвленням, методика[39]. Зіскрібок береться желобоватым зондом чи тупий ложечкою з уретри. З ложечки біологічний матеріал витягався списом для перфорації шкірного покриву. Виділення бралися мазком — отпечатком.

Скла оброблялися як і, як і посуд, колишня у вживанні, милися і кип’ятилися 15 хвилин, у 0,5% мильному розчині, потім багаторазово ополаскивались у гарячій води та щонайменше 5 разів у дистильованої. Після цього сушилися в сухожаровом шафі. Далі натиралися між двома дощечками з прикреплённой тканиною і давалися до досвіду в суміш спирту з ефіром 1:1. (Чистота скла у цій діагностиці має важливе значение!).

Відібраний матеріал эмульгировался (дуже ніжно) на матеріальному склі, після чого высушивался надворі 20−30 хвилин, потім офарблювався — 1% розчином метиленового синього, протягом 3 хвилин. У позитивних випадках, виявляли трихомонады різної форми. Не більше одній на полі зрения.

Ядро забарвлювалося в темно — синій, а протоплазма — в блідо-синій колір. Трихомонады мали: овальну, круглу і грушоподібну форми. Препарат виглядав зі збільшенням 630 з иммерсионным объективом.

2.3 Дослідження методом ПЦР.

Для ПЛР — діагностики використовувалися зіскрібки уретры.

Усі аналізи з урахуванням цього за групами хворих проводилися співробітниками кафедри Шкірних і венеричних хвороб Одеського Державного Медичного Университета.

Результати обстежених люб’язно надані {XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX}! Вибачте цієї людини не указываю!

3.РЕЗУЛЬТАТЫ ДОСЛІДЖЕНЬ ТА ЇХНІ ОБСУЖДЕНИЕ.

Під час проведення власних досліджень з порівнянню різних методів діагностики трихомоноза чоловіки, загальна кількість яких становила 150 людина, було отримано такі результати: найбільш вдалим методом діагностики трихомоноза є метод мікроскопії пофарбованого мазка. Його інформативність становила 71%. Далі слід метод ПЛР, (до складу якого у собі дані досліджень з різним групам), він становив 26%. І найменш інформативним, отже, менш надійним методом діагностики трихомоноза, виявився культуральний метод. Його інформативність становила 3%. Отримані результати відбиті малюнку 1.

З результатів досліджень можна зробити такі висновки: для експрес — діагностики мочеполового трихомоноза найзручніше використовувати метод мікроскопії пофарбованого препарату уретрального соскоба чи пофарбованого мазка виділень. Більше надійний результат буде за проведенні попередньої провокації пирогеналом. Що стосується непереносимості препарату (хворих із гострими пропасними захворюваннями, вагітні, гіпертоніки, діабетики), може бути замінити певної комбінацією продуктів дратуючих слизову оболонку желудка.

Він має, над іншими способами діагностики, ряд переваг: порівняно недорогий та простий у проведенні, результат досягається після закінчення короткого проміжку часу, не вимагає застосування дорогого лабораторного устаткування й високій кваліфікації персонала.

Що стосується методу ПЛР — діагностики трихомоноза, можна назвати таке: зі своєї інформативності він сьогодні ще поступається методу мікроскопії пофарбованого мазка. Це пов’язано з недостатньою ступенем очищення ДНК — збудника від баластових компонентів біоптату. Вагомим недоліком ПЛР методу є, складність постановки досвіду, необхідність застосування дорогого устаткування й високу вартість анализа.

Нині метод ПЛР діагностики T. vaginalis ще недостатньо відпрацьований. Такий висновок можна зробити підставі даних наданих співробітниками кафедри Шкірних і венеричних хвороб ОГМУ.

Метод ПЛР підтвердив би наявність трихомонад в хворих отнесённых до групи ризику на 36%. У хронічних хворих на характерними симптомами цей показник становив 34%, хронічні хворі без симптоматики і «здорові» первинне обстежувані, дали по-15% підтвердження. Ця інформація відбито малюнку 2.

Культуральный метод виявився найменш інформативним під час проведення досліджень, йому припадає лише 3% виявлення трихомонад. У порівнянні з методиками, приведёнными раннє, якого є найтривалішим і найменш надійною для діагностики трихомоноза.

3.1 Аналіз даних виявлення T. vaginalis жителі Одеського региона.

Інформація, представлена на малюнках 3 і 4, отримали в результаті аналізу даних відділу медичної статистики. Вона відбиває динаміку випадків первинного виділення збудника трихомоноза в чоловіків і жінок на період 1998 — 2003 роки. База даних із захворювань за 2004 рік перебуває в стадії обработки.

.

За даними по Одеської області можна зробити висновок, що різке збільшення захворюваності відбулося період із 1998 по 1999 роки. За період із 1999 по 2000 минулий рік захворюваності був незначним. Піковий показник має кількість хворих 2001 року, проти 2000 роком, кількість хворих виросло на дві тисяч чоловік. У 2002 року захворюваність становить рівня 2000 року, а 2003 знову спостерігається невеличкий підйом. У зв’язку з тим, що хворі до лабораторії надходять добровільно, виходячи з поганого самопочуття чи певних підозр, цю статистику вважатимуться близька до реальної захворюваності на нашу региону.

Різні показники выявляемости трихомонад в чоловіків і жінок зумовлені низкою причин. Домінуючими, серед яких є такі: жінки серйозніші ставляться до власного здоров’я, отже, частіше відвідують лікарів. Анатомія жіночих геніталій така, що з трихомонад створюються сприятливі умови, і є підстави непоміченими тривалий час. У такі випадки настає трихомонадо — дотримання, а присутність «стёртых» симптомів часто приймається за норму і пов’язують із циклами. Кількість трихомонад в жінок завжди велике. Тож діагностики досить взяти мазок — відбиток в певний период.

У чоловіків інфікування неспроможна залишитися непоміченим, т.к. після влучення збудника перша фаза запалення розвивається у уретре. А уретрит чітко відчувається у момент сечовипускання. З цієї причини багато паразитів вимиваються, отже їх важче виявити при паркані материала.

Отже, за 1998 рік збудник вперше виявлено в 4338 людина, у тому числі: чоловіки — 1462, жінки — 2867. За 1999 рік, захворіло 9543 людина, у тому числі: чоловіків — 2479, жінок — 7064. 2000 року загальна кількість хворих залишило 10 242 людина. У тому числі: чоловіків — 2411, жінок — 7831. Загальна кількість хворих на 2001 року становило 12 265: чоловіків — 3243, жінок — 9022. За період 2002 року захворіло 10 329 людина, де б чоловіки склали 2448, жінки — 7881. 2003 рік дав загальна кількість хворих 10 541, з яких чоловіки склали 2833, а жінки — 7708.

Выводы.

1. При діагностиці трихомоноза найбільше значення слід надавати методу мікроскопії забарвлених препаратів. На підтвердження результатів можна скористатися ПЛР діагностикою. Робити висновок з урахуванням культурального методу не можна. Жоден з методів діагностики не має абсолютної информативностью.

2. Надійність діагностики трихомоноза в чоловіків і жінок різна. Можливість виявлення паразитів в жінок значно выше.

3. Пік захворюваності трихомонозом щодо Одеського регіону посідає 2001 год, найменше відзначалося 1998 року. Початок 2004 року характеризується невеликим підйомом заболеваемости.

1.Абдумаликов Р. А. Комплексний спосіб терапії хворих мочеполовым трихомоніазом: Дисс… канд. мед. наук. — М., 1995. — 4, 12 — 14,16,19−24 с.

2.Адаскевич В. П. Інфекції, передані статевим шляхом. — Нижній Новгород: Медична книга, 1999. — 416,417,419,421с.

3.Анчупане І.С. Урогенітальний трихомоніаз і змішані трихомонадногонококковые інфекції: Автореф. дисс. … канд. мед. наук. — М., 1992. — 4,6,12,32−36 с.

4.Аковбян У. А., Прохоренко У. І. Хвороби, передані статевим шляхом: Уроки минулого й погляд, у майбутнє // Вестн. дерматол. — 1995. — № 3. — З. 16- 19.

5.Беднова В. М., Погорільська Л. В., Васильєв М.М. та інших. Тактика обстеження терапії хворих інфекційними урогенитальными захворюваннями, осложнёнными дисбактеріозом (посібник для лікарів). М.: Медицина, 1996. — 14,16,19−21,24,32 с.

6.Беднова В. М., Васильєв М. М. Застосування протеолітичних ферментів для лікування трихомониаза.//Вестн. дерматол. і венерол. -1992. -№ 2. -с.15−24.

7.Борисов Л. Б., Козьмин-Соколов Б. М., Фрейдлін І. З. Керівництво до лабораторним занять з медичного мікробіології, вірусології і імунології. — Москва: Медицина, 1993. — 7−9 с.

8.Бухарин О. В., Усвяцов Б. Я. Бактерионосительство. Москва: Медицина, 1996. 206−214 с.

9.Васильев М. М. Особливості клініки мочеполового трихомоноза, вдосконалення діагностику і лікування (клинико-экспериментальное дослідження): Автореф. дисс… докт. мед. наук. — М., 1990. -10−16,18,28 с.

10.Вахнина ТОБТО. Удосконалення лабораторної діагностики мочеполового трихомоніазу: Автореф. дисс… канд. биол. наук. — М., 1990. — 8,11,13- 15,21 с.

11.Громыко А. І. Епідемія захворювань, переданих статевих шляхом в країнах Східної Європи // ЗППП. — 1996. — № 6. — З. 22−25,27.

12.Делекторский В. В., Хабаров В. А., Скуратович А. А. та інших. // 5-ї Всеросійський з'їзд дерматологів: Тези доповідей. — У.: Медицина, 1983. — З. 4, 9,11,83.

13.Земцов М. А. Сучасні методи лікування мочеполового трихомоніазу і трихомонадно-хламидийной інфекції в жінок: Автореф. дисс… канд. мед. наук. — М., 1995. — 19,20,21с.

14.Кисина В.І., Беднова В. М., Погорельская Л. В. Тактика обстеження терапії хворих інфекційними урогенитальными захворюваннями, ускладненими дисбактеріозом. Посібник для лікарів. — Москва: Медицина, 1996.-14−22 с.

15.Клименко Б. У. Трихомоноз. -Москва: Медицина, 1987.-33, 41, 44, 160, 164, 165, 169, 170−174, 176,179 с.

16.Кожные і венеричні хвороби: Довідник / Під ред. О.Л. Іванова. — М.: Медицина, 1997. — З. 352, 355, 357, 359.

17.Курашвили Н. В. Вивчення деяких біологічних і імунологічних зрушень в хворих з трихомоніазом властивостей: Автореф. дисс… канд. биол. наук. -Т., 1989. — 3−21,23,25с.

18.Машковский М. Д. Лікарські коштів. Посібник для лікарів. У 2 томах. — Т. 2. — Х.: Торгсинг, 1998. — 372−373 с.

19.Межевитинова Е. А. Трихомонадный вульвовагинит: клініка, діагностика і лікування. — Москва: Медицина, 1999. -17−22,24,25 с.

20.Мешков А. М. Комплексний метод лікування хворих на запальними захворюваннями урогенитального тракту хламідійної і уреаплазменной етіології: Автореф. канд.мед. наук. — М., 1987. — 12,13,17−22с.

21.Микробиологические живильні середовища. Справочник/Под ред. М. М. Меджідова. — М.: Медицина, 1989. — З 75−76.

22.Овчинников М. М., Беднова М. У., Делекторский У. У. Лабораторна діагностика захворювань, які передаються статевим шляхом. — Москва: Медицина, 1987. — 300−302,304 с.

23.Павлов З. Т., Шапошников Про. До., Самців У. І., Ільїн І. И./Кожные і венеричні хвороби / Під ред. Про. До. Шапошникова. — М.: Медицина, 1985. — З. 368,372−375.

24.Павлович З. А. Медична мікробіологія. — Мінськ: Вышэйшая школа, 1997. — 125,126 с.

25.Панкратов У. Р., Панкратов Про. У., Стрільців Про. Є., Барцевич Є. У. Лікування урогенитального трихомоноза // Медичні новини. — 1996. — № 4. — З. 47−50.

26.Палканов У. З., Глазкова Л. До. Запальні захворювання геніталій в дівчат та вродливих дівчат. Навчальний посібник для субординаторов акушерівгінекологів, педіатрів і лікарів — інтернів. — Свердловськ: Вид. Свердловського медичного інституту, 1990. — 83−89 с.

27.Поздеев Про. До. Медична мікробіологія. — Москва: ГЭОТАР — МЕД., 2001. — 533, 534 с.

28.Реброва Р. Н. Гриби роду CANDIDA при захворюваннях негрибковой етіології. — Москва: Медицина, 1989. — 128−132 с.

29.Лечение захворювань, переданих статевим шляхом / під. ред. Васильєва М. М. — М.: Медицина, 1985. — 133,135,136,138 с.

30.Руководство по лабораторної діагностики вірусних і риккетсиозных хвороб / під ред. проф. П. Ф. Здродовского, проф. М. І. Соколова. — М.: Медицина, 1965. -З. 87.

31.Скрипкин Ю. До., Машкилейсон А. Л., Шарапова Р. Я. Шкірні і венеричні хвороби. — Москва: Медицина, 1995. — 464, 467 с.

32.Слюсарев А. А. Біологія із загальною генетикою. — Москва: Медицина, 1978. — 298с .

33.Тихомиров О. Л. Тиберах. Лікування захворювань, переданих статевим шляхом. — Москва: Медицина, 1988. — 14, 15, 18, 21−24,36 с.

34.Худайбердиев Н. А. Вплив хронічного мочеполового трихомоніазу на репродуктивну функцію чоловіків. — Москва: Медицина, 1989, — 86−88 с.

35.Шакиров М. Т. Захворювання, передані статевим шляхом, чоловіки — гомосексуалістів (клинико-лабораторное, медико-социологическое, электронномікроскопічне дослідження): Автореф. дисс… мед. наук. — М., 1991. — 9- 18,24,30 с.

36.Щербакова Н.І., Брагіна Е. Е. Моделювання змішаної хламидийно — трихомонадной інфекції «in vitro ». Хламідії (гальпровии) і хламидиозы // Вестн.дерматол.венерол. — 1982. — № 3. — З. 19−22.

37.Юдина І.Ф., Имшенецкая Л. П., Добровольська Л. И. Діагностика трихомоноза. — Москва: Медицина, 1988. -71−74 с.

38.Яговдик М. З., Хилькевич М. Д. Асоційовані уреаплазная і трихомонадная інфекції чоловіки, хворих гонорею // Вестн. дерматол. — 1992. — № 11.- З. 47−51.

39. Довідник по венеричним хворобам / под.ред. М. З. Яговдика. — М. — Беларуська навука, 1998. — з. 275 — 285.

40.Яцуха М. В. Деякі аспекти епідеміології трихомоноза.//Вестн. дерматол. і венерол. — 1989. — № 1. — З. 9−36.

41.Fouts A., and S.J.Kraus. Trichomonas vaginalis: reevaluation of its clinical presentation and laboratory diagnosis. // J.Infect. Dis., 1990. v.14,№ 9. -Р.137−143.

42.Lindmark D. G at al. Carbohydrate, energy and hydrogenosomal metabolism of Trichomonas foetus and Trichomonas vaginalis. // J.Protozool. — 1989.-v.36, № 2. -Р.214−216.

43.Lin P.R., Shao M.F., Liu J.Y. One-tube, nested — PCR assay for the detection of Trichomonas vaginalis in vaginal discharges. Ann. Trop. Med. Parasitol. 1997. v.19, РРРтлиорирпмршпппрпР.437−440.

44.Madico G., Quinn T.C., Rompalo A. et al. Diagnosis of Trichomonas vaginalis infection by PCR using vaginal sw. samplas. // J. Clin. Microbiol. -2000.-v.36, № 11. Р.320−329.

45.Okayama T., Takahashi R., Mori M et al. Polymerase chain reaction amplyfication of Trichomonas vaginalis DNA from Papanicolau strain smeas. Diagn. Cytopathol. 1998. v.19, 6. Р.437−440.

46.Paterson BA, Tabrizi SN, Garland SM, et al. The tampon test for trichomoniasis: a comparison between conventional methods and a polymerase chain reaction for Trichomonas vaginalis in women. Sex Transm Infect 1998. Р.136−139.

47.Petrin D., Delgaty K., Bhatt R., Garber G. Clinical and micribiological aspects of Trichomonas vaginalis.// Clin. Microb. Reviews. 1998.-v.11, No 2. Р. 300−317.

48.Ryu J.S., Chung H.L., Min D.Y. et al. Diagnosis of trichomoniasis by polymerase chain reaction. Yonsei Med. J. 1999. v.40, 1. Р.56−6 …

My phone in Odessa: +380 667 708 667.

———————————;

[pic].

[pic].

[pic].

[pic].