Обоснование ефективності зон підвищеної проникності в пласкою частини цилиарного тела

Экспериментальное обгрунтування ефективності зон підвищеної проникності в пласкою частини цилиарного тіла, створюваних з допомогою диод-лазерных аппликаций.

Experimental ground of pars plana rise permeability areas efficacy created by diode-laser application.

New method of pars plana rise permeability areas creation by diode laser application was worked out and studied. Transscleral infrared laser application leads to adsorbing energy in pigmented tissue, that is why pigment epithelium barrier destroys in coagulation area. Therefore the permeability of eye wall in coagulation area increases for medicines substances injected subconjunctivally.

25 rabbits were involved in the experimental work. Scintigraphic method of registration of I131 radioactivity in eye tissues has been used. We find that I131 accumulation in vitreous body after subconjunctival injection in operated eyes 2.94 times more than in control in the first hours after injection. But very small quantity of I131 penetrate the eye wall due to strong systemic absorption into conjunctival and ciliar vessels. Therefore frequent instillation of vasoconstictor agent (10% phenylefrin solution) associated with subconjunctival injection of I131 solution has been used. This method led to much more effective results: 0.2% from all quantity of I131 were find in vitreous body after 1 hour after injection that is 4.76 times more than in control.

The method can give to ophthalmologists new high-effective atraumatic opportinity to deliver drugs into posterior eye segment for topical treatment of retinal and optic nerve disorders.

Актуальной проблемою сучасної офтальмології є проблема ефективної доставки лікарських засобів при патології заднього відрізка очного яблука. Широке поширення таких захворювань, як глаукомная оптична нейропатия, діабетична ретинопатия, передня ішемічна нейропатия, макулодистрофія зумовлюють необхідність розробки надійних способів створення терапевтичних концентрацій лікарських препаратів у сітківці і глядачевій нерві.

Существующие нині способи запровадження лікарських субстанцій на лікування сітківки і зорового нерва є оптимальними. Так, найширше застосовувані парабульбарные і ретробульбарные ін'єкції підвищують ризик розвитку орбітальної гематоми разом із тим мають дуже низькою ефективністю у зв’язку з високим відсотком абсорбції діючої субстанції в системний кровотік. Використовувана у низці клінік субтеноновая імплантація колагеновій инфузионной системи у різних модифікаціях має значно більшою ефективністю у зв’язку з адресної доставкою активного речовини до області заднього полюси очного яблука [4]. Але й вона позбавлена недоліків. Передусім, у її установці відбувається певна травматизація очі й підвищується ризик інфекції у процесі силіконовою трубочки, а во-вторых, вводимым медикаментам, як досягти сітківки і интраокулярной частини зорового нерва, необхідно проникнути через шар судин хориоидеи, і навіть через пігментний епітелій, входить до складу гематоофтальмического бар'єра, що є потужним перешкодою.

Поэтому пошуку нових малотравматичних способів доставки лікарських засобів у область заднього сегмента очі має велику практичного значення.

На кафедрі очних хвороб РГМУ було розроблено та апробована нову методику створення зон підвищеної проникності у сфері пласкою частини цилиарного тіла з допомогою диодного лазера (патент на винахід РФ № 2 149 615).

Суть методу ось у чому [5]. Випромінення напівпровідникового лазера перебуває у інфрачервоної зоні спектра й володіє здатністю проникати через малопигментированные тканини, мало пошкоджуючи їх, і адсорбироваться в структурах, багатих меланином, викликаючи виражений термічний опік [1,2,3,6]. Отже, використовуючи транссклеральную (без отсепаровки кон’юнктиви) лазеркоагуляцию пласкою частини цилиарного тіла (ЛЦК), ми створюємо у цій зоні ділянки, позбавлені пігментного епітелію і кровоносних судин. Така маніпуляція дозволяє на період близько місяця забезпечити підвищену проникність у цьому ділянці для лікарських засобів, впроваджуються субконьюнктивально. Це пов’язано з тим, що як така склера є структурою з низьким опором для дифузії лікарських засобів. Активні речовини, потрапляючи всередину очі, депонуються в стекловидном тіло і з його струмом досягають заднього полюси очі, що й надають лікувальне дію. Клінічно апробована методика вимагала експериментального підтвердження для уточнення дозувань і термінів запровадження препаратів. Для цього він і це проведено дане експериментальне дослідження.

Материал, методи лікування й результати дослідження.

В дослідженні використовували 25 кроликів породи шиншила вагою 2,5−3 кг. Кролики було поділено на 3 групи. До першої входило сім особин, що у першого дня експерименту обох очах було зроблено операція ЛЦК по стандартної методиці.

Методика проведення ЛЦК.

После эпибульбарной инстилляционной анестезії розчином пропракаина у верхній сегменті (на 12 годиннику) в проекції пласкою частини цилиарного тіла наносилося 3−6 рядів коагулятов (загальна кількість коагулятов 8−15). Потужність лазера становила 1 Вт, експозиція — 3 сек.

Через 2 діб після створення полупроницаемых мембран всім кроликам під кон’юнктиву у сфері лазерциклокоагуляции здійснювалася субконъюнктивальная ін'єкція фізрозчину, що містить стандартне кількість радіоактивної мітки I131. Потім, з інтервалом один добу, тобто. через 1,2,3,4,5,6 і аналогічних сім днів після введення маркера, проводився забій тварин із наступним дослідженням радіоактивності склистого тіла (СП) очі кролика.

Исследование з допомогою сцинтиографа показало, що радіоактивність витрума сягає максимуму у добу, залишається підвищеної наступного дня та практично не відрізняється від фонових значень наступного дня (рис. 1). Результати, отримані нами, послужили підвалинами коригування термінів дослідження та дозволили акцентувати увагу на визначенні змісту радіоактивної мітки в тканинах очі у добу після введення препарату.

.

Рис. 1. Інтенсивність сцинтилляций на хвилину зразків біологічних тканин після запровадження розчину з радіоактивної міткою (фонове значення 40−50 сцинтилляций в минуту)..

Вторая група включала у собі 4 тварин. З результатів дослідження змісту I131 в СП кроликів з першого групи тут було зроблено спробу визначення кількісного розподілу радіоактивної мітки протягом діб в різних структурах очі. І тому після подконъюнктивального запровадження розчину радіоактивного йоду проводився забій тварин через 4, 8,16 і 24 години. З кожного энуклеированного очі, замороженого шляхом занурення в рідкий азот, з допомогою трепана діаметром 7 мм з глибиною установки плунжера 1 мм отримали 8 навесок:

1. склера в проекції цилиарного тіла у сфері коагулятов (на 12 годиннику).

2. склера в проекції цилиарного тіла у районі, протилежному нанесення коагулятов (на 6 годиннику).

3. Склоподібне тіло до проекції цилиарного тіла у сфері коагулятов (на 12 годиннику).

4. Склоподібне тіло до проекції цилиарного тіла у районі, протилежному нанесення коагулятов (на 6 годиннику).

5. Роговиця.

6. Волога передній камери.

7. Склера у сфері зорового нерва.

8. Склоподібне тіло до області зорового нерва.

Кроме того, окремо була виміряти радіоактивність всього що залишився витреального речовини, як гаданого депо введеної субстанції.

В результаті вироблених вимірів нами було отримано такі дані.

Из мал.2 видно, що I131 до області пласкою частини цилиарного тіла у зоні коагулятов через 8 годин відзначається підвищення радіоактивності склистого тіла в прилежащей області, яке сягає максимуму через 12 годин, та був починає знижуватися внаслідок переміщення мітки разом із витреальным струмом.

.

Рис. 2. Інтенсивність сцинтилляций на хвилину зразків біологічних тканин протягом перших 4, 8,12 і 16 годин після введення розчину з радіоактивної міткою у кроликів після ЛЦК (фонове значення 40−50 сцинтилляций в минуту)..

Через 12 годин спостерігається значне підвищення кількості сцинтилляций зразків склистого тіла у зоні зорового нерва, яке сягає свого максимуму до 16 годинах. Одночасно фіксується адекватне збільшення радіоактивності навішення, до складу якої входить склера, хориоидея і сітківка у цій самій області. Дослідження випромінювання що залишилася витреальной маси показало значне зростання концентрації I131, викликає через 4 години 2-хкратное, а ще через 16 годин — 4-хкратное перевищення фонових значень радіоактивності.

Вместе про те, дані сцинтиографии показують, що потрапляння радіоактивної мітки до області передній камери очі незначно (дані дослідження вологи передній камери, й роговиці), що дозволяє припустити переважну спрямованість поширення введеної субстанції в задній відділ очного яблука.

Третья група кроликів з 4 особин, була контрольної. Цим тваринам не здійснювалася коагуляція цилиарного тіла. Запровадження препарату як дослідження энуклеированных очей вироблялося ті ж строки й за тією ж схемою, як і в тварин другої групи.

Исследование зразків у контрольної групі виявило значно менше проникнення радіоактивного йоду всередину очного яблука. Так, зміст I131 у внутрішніх структурах очі була настільки малим, що дослідження випромінювання навесок не виявило значимого підвищення радіоактивності внутрішньоочних структур (рис. 3).

.

Рис. 3. Інтенсивність сцинтилляций на хвилину зразків біологічних тканин протягом перших 4, 8,12 і 16 годин після введення розчину з радіоактивної міткою у кроликів без ЛЦК (фонове значення 40−50 сцинтилляций в минуту)..

Особенно це добре видно на графіці, иллюстрирующем значення сцинтилляций склистого тіла в цілому у порівнянні з значеннями у кроликів досвідченої групи (рис. 2). Так, за даними дослідження, через 4 години після введення витреальная концентрація I131 в досвідченої групі перевищує контроль в 1,87 разу, через 8 годин на — 1,76, а ще через 12 годин — в 2,45. Після закінчення 16 годин перевищення змісту I131 в стекловидном тілі досвідченої групи більше контролю у 2,94 разу.

В той час у відсотковому співвідношенні кількість радіоактивної мітки дуже мало і як тисячні частки відсотка, може бути замало розвитку значимого клінічного ефекту під час введення лікарських засобів у лікувальної практиці. На нашу припущенню, значне кількість введеної субконъюнктивально радіоактивної мітки адсорбируется в системний кровотік крізь судини кон’юнктиви, цилиарного тіла, а також, можливо, і хориоидеи. Тому нами склалася четверта група 10 тварин, яким протягом години до запровадження препарату і далі протягом усього періоду до забою з інтервалом за 30 я хвилин проводилися инстилляции 10% розчину фенилэфрина, який володіє потужним сосудосуживающим дією.

На правих очах тварин цієї групи вироблялося нанесення коагулятов по описаної вище методиці, ліві очі служили контролем. Забой п’яти тварин здійснювався через 1 годину після введення препарату, решти п’яти — через 3 години. При дослідженні радіоактивності зразків склистого і цилиарного тіла відзначалося швидке проникнення препарату всередину очі вже годину після ін'єкції, причому у досвіді в стекловидном тілі виявлено 0,2% від введеного кількості радіоактивної мітки (загалом 1190 сцинтилляций на хвилину), що перевищує значення радіоактивності в конрольной групі в 4,76 разу (250 сцинтилляций на хвилину). Через 3 години ці показники зменшилися і становили середньому 420 і 179 сцинтилляций на хвилину відповідно (0,07% і 0,03% від введеного субконъюнктивально кількості I131). З іншого боку, відзначалося деяке накопичення радіоактивної мітки в цилиарном тілі: через 1 одну годину на досвідченої групі воно становило 307 сцинтилляций, у контролі - 117, а ще через 3 години — 112 і 78 відповідно (рис. 4).

.

Рис. 4. Інтенсивність сцинтилляций на хвилину стеловидного і цилиарного тіла протягом перших 1 і трьох годин після введення розчину з радіоактивної міткою у кроликів і натомість инстилляций фенилэфрина в досвіді та контролі (фонове значення 40−50 сцинтилляций в минуту)..

Выводы.

Методика запровадження I131 в подконъюнктивальное простір у сфері коагуляції пласкою частини цилиарного тіла показала, що очагова елімінація пігментного епітелію у зоні pars plana призводить до значного підвищення проникності цієї маленької частини оболонки очі для лікарських засобів. Максимальне значення змісту активного речовини в стекловидном тілі характеризується використанні сосудосуживающих препаратів, дозволяють тимчасово зменшити кровотік у судинах кон’юнктиви і цилиарного тіла. Досягнення бажаної концентрації у сфері заднього полюси очі відбувається вже у години після введення. Така фармакодинамика зумовлює високий терапевтичну ефективність нового малотравматичного методу створення зон підвищеної проникності разом із курсом щоденних субконъюнктивальных ін'єкцій лікарських засобів на лікування захворювань заднього сегмента очі.

1. Даниличев В. Ф. «Сучасна офтальмологія». // Санкт-Петербург. «Пітер», 2000 р., з. 516−517.

2. Качанов А. Б. Диод-лазерная транссклеральная контактна циклокоагуляция при лікуванні різної форми глауком і офтальмогипертензий, автореферат дисертації к.м.н. Москва — 1995.

3. Нестеров О. П. «Глаукома». // Москва. «Медицина», 1995 р., з. 112−113.

4. Нестеров О. П., Басинський С. Новий метод запровадження лікарських препаратів у задній відділ субтенонового простору.// Вісник офтальмології, 1991 р., № 5, з. 49−51.

5. Нестеров О. П., Бровкина А. Ф. Єгоров Е.А., Єгоров А.Є. Спосіб запровадження лікарських засобів при захворюваннях заднього відрізка очі. // Патент на винахід РФ № 2 149 615.

6. Nesterov A.P., Egorov E.A., Egorov A.E., Katz D.V. Modified technique of contact diode cyclophotocoagulation for far-advanced glaucoma (preliminary study) // 6th Congress of EGS, Millenium meeting, London, 2000.