Влияние чинників преаналитического етапу на якість результатів лабораторних досліджень

Влияние чинників преаналитического етапу на якість результатів лабораторних исследований

Гудер В. Г. та інших.

Биологические чинники. Неустранимые факторы

Внутренние чинники, такі як раса, підлогу та вік, можуть проводити концентрації досліджуваних клинико-химических і гематологических аналитов. Ці чинники є індивідуальними особливостями пацієнта і тому їх можна усунути. Дуже часто внутрішні і його зовнішні чинники важко разграничить.

Возраст впливає концентрації аналитов у крові та сечі під час відразу після народження, в пубертатний період, і на старості. Кількість еритроцитів і, отже, гемоглобін у новонароджених значно вища, ніж в дорослих. Кілька перших днів після народження підвищений вміст кисню в артеріальною крові викликає руйнація еритроцитів. Це спричиняє підвищенню змісту гемоглобіну і посиленому перетворенню їх у білірубін. Оскільки функція печінки (у разі - особливо глкжуронидация) у новонароджених ще повністю встановилася, спостерігається підвищення концентрації билирубина.

Концентрация сечовий кислоти у новонароджених перебуває у тієї ж межах, як і в дорослих людей. Проте, в протягом днів після народження відзначається її значно знизився рівень. Серед інших прикладів вікової залежності - активність лужної фосфатазы (ЩФ) в сироватці (пік якої у період фази зростання відбиває активність остеобластов в кістковій тканині) і змістом загального холестерину і липопротеинов низької густини. З іншого боку, вікова залежність активності ЩФ та змісту липопротеинов низької культури й високої густини в сироватці відчуває вплив статі. Ці статевих відмінностей, своєю чергою, змінюються з возрастом.

Раса. Зміст аналитов від расової приналежності. У порівняні з європейцями у чорношкірих американців обоего статі зміст лейкоцитів значно коротші. Ця різниця легко пояснюється з допомогою зменшеного числа гранулоцитов. Навпаки, зміст гемоглобіну, гематокрита і кількість лімфоцитів однакова у обох групах. Кількість моноцитів у європейців перевищує цей показник у негрів. Значні розбіжності у активності креатинкиназы спостерігаються на обох статевих групах між європейцями і неграми. Ці розбіжності не залежить від різниці у віці, зростанні й масі тіла. Істотні розбіжності у активності амилазы виявлено між корінними жителями Західної Індії, та споконвічними британцями. З узвичаєного граничного значення, 50% уродженців Західної Індії мали підвищену активність амилазы.

Значительные расові відмінності було виявлено щодо концентрації в сироватці вітаміну В12 (у негрів населення концентрація вище в 1,35 разу (183)) і Lp (a) (проти європейцями у негрів концентрація вдвічі вище). Важливо, що заодно у негрів, які мають високий рівень Lp (a), були підвищено ні частота виникнення атеросклерозу, ні смертность.

Пол. Як і відношенні зовнішнього виду та специфічних кожному за статі гормональних рівнів, відмінності може бути виявлено й у клинико-химических і гематологических показниках). Статеві розбіжності у концентрації заліза в сироватці зникають у пацієнтів старших 65-літнього віку років. Статеві відмінності є й у активності креатинкиназы, й у концентрації креатинина. Сывороточная активність і концентрація залежить від м’язової маси, що зазвичай більш виражена чоловіки. Певна спортивна тренування, веде до збільшення м’язової маси, може згладжувати ці различия.

Беременность. Трактуючи результати лабораторних досліджень у вагітних, необхідно враховувати термін вагітності в останній момент взяття проби. При фізіологічної вагітності середній обсяг плазми зростає приблизно від 2600 мл до 3900 мл, причому у перші 10 тижнів приріст то, можливо незначним, та був відбувається дедалі більше збільшення обсягу до 35 тижню, коли досягається зазначений рівень. Обсяг сечі він може фізіологічно збільшуватися до 25% в 3-ем триместрі. У цьому триместрі спостерігається 50%-ное фізіологічне підвищення швидкості клубочковой фільтрації. Добре відомі властиві вагітності зміни вироблення і концентрації в плазмі статевих гормонів супроводжуються змінами різних аналитов, наприклад тироидных гормонів, метаболітів, електролітів, білків та деякі диагностически важливих ліпідів, ферментів, чинників згортання і компонентів фибринолитической системи. Швидкість осідання еритроцитів при вагітності зростає у 5 раз. Зміни концентрацій аналитов викликані підвищенням синтезу транспортних білків, збільшенням швидкості обмінних процесів і розведенням крові.

Изменение фізичного состояния

Диета і споживання рідини служать основними чинниками, впливають на багато аналиты у клінічній хімії. Ступінь викликаних прийомом їжі змін змісту аналитов залежить від складу їжі часу, минулому від часу приймання їжі до взяття проби. На концентрацію холестерину і триглицеридов в сироватці впливають такі чинники, як склад їжі, фізична активність, куріння, вживання алкоголю і кави. Навпаки, при дієті, багатою білками, і нуклеотидами, спостерігається підвищення рівнів аміаку, сечовини і сечовий кислоти. Зміни, наблюд, ющиеся після прийому стандартного кількості вуглеводів (75 р), використовують у діагностиці щодо толерантності до глюкозі. З іншого боку, недостатнє харчування і голодування можуть невпізнанно змінити концентрації аналитов клінічно значимим чином. Ранніми індикаторами бідної білками дієти є зниження концентрації преальбумина і ретинол-связывающего білка.

Голодание. Тривале голодування тісно пов’язані зі зниженням витрати енергії як наслідок, в сироватці знижено концентрація Т4 і ще більшою мірою Т3. Крім цих змін, якщо голодуванні також змінюється экскреция з сечею багатьох речовин. Экскреция з сечею аміаку і креатинина підвищується тоді як виділення сечовини, кальцію і фосфатів знижується. Зміни концентрації аналитов якщо голодуванні подібні тим, які простежуються у пацієнтів після хірургічних втручань й у катаболическом стані.

При кількісному вимірі рівнів сечовий экскреции переважно виконувати визначення показників за добу, ніж літр, аби внеможливити вплив кількості выпиваемой води та її выведения.

Во запобігання неправильної інтерпретації лабораторних успіхів у ролі процедури взяття зразків рекомендується виробляти після 12-часового голодування і за зниженою фізичної активности.

Физические вправи. Слід виділити 2 типу вправ. При вправах першого типу — статичних чи изометрических вправах короткій тривалості і високої інтенсивності - використовується енергія, вже запасена в м’язах (АТФ, креатинфосфат), і за вправах другого типу — динамічних чи изотонических вправах малої інтенсивності і великий тривалості (наприклад, біг, плавання, їзда на велосипеді) — використовується АТФ, утворюваний аэробным чи анаэробным шляхом. Крім того, треба враховувати вплив фізичної тренованості і м’язової маси. Швидко виникаючі зміни аналитов під час вправ обумовлені зрушеннями обсягів рідини між внутрисосудистым і интерстициальным просторами, втратою рідини у зв’язку з потоотделением і зміною концентрації гормонів (наприклад, підвищення концентрації адреналіну, норадреналіну, глюкагону, СТГ, кортизола, АКТГ і тенденції зниження концентрації инсулина).

Эти гормональні зрушення, на свій чергу, можуть спричинить змін числа лейкоцитів більш як на 25 г/л, а також підвищення концентрації глюкозы.

Изменения можуть почасти пояснюватися вищезгаданим зміщенням обсягу рідини з внутрисосудистого простору в интерстициальное чи втратою рідини з потім. Підвищення концентрації сечовий кислоти в сироватці є наслідком зниження її экскреции з сечею через підвищення концентрації лактату. Опосередкований гіпоксією приріст кретинкиназы залежить стану тренованості і, отже, показує високий рівень індивідуальної вариабельности. У фізично менш тренованого людини збільшення змісту креатинкиназы більш виражено. Тренування підвищує кількість і величину мітохондрій, що узгоджується з підвищеної ємністю окислительной ферментної системи. Це свою чергу, підвищує здатність м’язів споживати глюкозу, жирні кислоти і кетоновые тіла по шляхами аэробного окислення. Як наслідок, частка митохондриального изофермента КК — МВ зростає до 8% загальної активності креатинкиназы без ознак порушення функції міокарда. Добре треновані люди мають більш великий відсоток КК-МВ в кістякових м’язах проти нетренированными. Деякі інші аналиты також залежать від ступеня тренованості і м’язової маси. Так, зміст креатинина в плазмі, в сечі та її экскреция підвищено, а освіту лактату снижено після виконання фізичних вправ у тренованих людей проти нетренированными. Надмірна фізична навантаження може викликати появу у сечі еритроцитів та інших клітин крові. Тим щонайменше, викликані фізичним навантаженням зміни зазвичай зникають протягом кількох дней.

Высота над рівнем моря. Зміст деяких компонентів крові підтвердили значних змін в залежність від висоти над рівнем моря. Зі збільшенням висоти значне підвищення щодо, наприклад С-реактивного білка (до 65% на висоті 3600 м), (32-глобулина в сироватці (до 43% в розквіті 5400 м), гематокрита і гемоглобіну (до 8% в розквіті 1400 м) і сечовий кислоти. Адаптація до висоті займає тижня, а повернення до значенням лише на рівні моря надається протягом днів. Значне зниження величин зі зростанням висоти над рівнем моря виявлено щодо сечового креатинина, кліренсу креатинина, эстриола (до 50% в розквіті 4200 м), осмоляльности сироватки, ренина плазми і трансферрина сыворотки.

Стимуляторы й викликають залежність препарати як впливають чинників біологічного характера Кофеин міститься у багатьох компонентах повсякденної їжі. Попри його стала вельми поширеною, вплив кофеїну різні клинико-химические аналиты детально не досліджувана. Кофеїн ингибирует фосфодиэстеразу і, отже, розщеплення циклічного АМФ. Циклічний АМФ посилює гликогенолиз, збільшуючи цим концентрацію глюкози у крові. З іншого боку, концентрація глюкози зростає через стимуляції глюконеогенеза під впливом адреналіну. Активація триглицеридлипазы веде до троекратному підвищенню этерифицированных жирних кислот. Кількісне визначення гормонів і лікарських речовин, що з альбуміном, не може через викликаного жирними кислотами ефекту заміщення. Через 3 години після прийому 250 мг кофеїну підвищується активність ренина плазми і концентрація катехоламінів. Отже, для дослідження даних аналитов споживання кофеїну має учитываться.

Влияние куріння. Куріння викликає безліч гострих і хронічних змін концентрацій аналитов, причому хронічні ефекти скоріш помірні. Куріння підвищує концентрації в плазмі чи сироватці жирних кислот, адреналіну, вільного гліцерину, альдостерона і кортизола. Ці зміни спостерігаються не більше 1 години при куріння 1−5 сигарет. Зміни, викликані хронічним курінням, стосуються числа лейкоцитів, липопротеинов, активності деяких ферментів гормонів, вітамінів, пухлинних маркерів, важких металлов.

Механизм, лежить у цих змін, не повністю з’ясований. У тютюновому димі виявлено дуже багато сполук пиридина, ціанистий водень і тиоцианаты. Їх пряме і непряме вплив може враховуватися стосовно які виникають змін концентрации. Снижение активності ангиотензин-превращающего ферменту (АПФ) у курців визнається результатом деструкції клітин легеневого епітелію з наступним зниженням вивільнення АПФ у системі легеневого кровообігу і/або інгібуванням ферменту. Ступінь змін також залежить кількості, виду (сигарети, сигари, трубки) і техніки куріння (з вдиханням диму чи ні цього). З іншого боку, викликані курінням зміни залежить від віку і її пола.

Алкоголь. Вживання алкоголю на залежність від його тривалості і рівня впливає багато аналиты. Ці зміни частково йдуть на діагностику і терапевтичного моніторингу. Серед обумовлених алкоголем змін варто виділяти гостро і хронічно виникаючі изменения.

Остро виникаючі зміни (в протягом 2−4 годин) за умови вживання етилового спирту виявляються зниженням глюкози в сироватці і підвищення лактату в плазмі внаслідок гальмування глюконеогенеза у печінці. Етанол перетворюється на ацетальдегід і у ацетат. Це підвищує освіту у печінки сечовий кислоти. Разом з лактатом ацетат знижує зміст бікарбонату в сироватці, викликаючи метаболічний ацидоз. Підвищений рівень лактату знижує экскрецию з сечею сечовий кислоти. Як слідство, після гострого вживання алкоголю концентрація сечовий кислоти в сироватці зростає. Хронічні зміни, які під час вживанні етилового спирту включають підвищення на сироватці активності печінкових ферментів. Підвищення активності гамма-глютамилтрансферазы викликається індукцією ферменту. Активність глютаматдегидрогеназы, як і аминотрансфераз (ACT, АЛТ), підвищується внаслідок прямого токсичного впливу печінку. Підвищення у крові десиалированных білків (наприклад, углевод-дефицитного трансферрина) пов’язані з гальмуванням ферментативного гликозилирования в пост-трансляционной стадії освіти цих білків у печінці. За хронічної алкоголізмі зміст сироваткових триглицеридов зростає внаслідок зниження розщеплення триглицеридов в плазмі. Підвищення MCV може пов’язуватися з прямим токсичною впливом на кровотворні клітини чи у дефіцит фолієвої кислоты.

Препараты, викликають залежність. Викликають залежність речовини, такі як амфетамин, морфін, героїн, марихуана і кокаїн, можуть впливати на результати лабораторних тестів. Морфін викликає спазм сфінктера Одци, що зумовлює підвищенню таких ферментів, як амилаза і липаза.

Взятие зразків. Вплив циркадного ритма

Некоторые аналиты виявляють тенденцію до коливань їх концентрації в плазмі протягом доби. Так, концентрація калію нижче пополудні, проти ранкової, тоді як зміст кортизола зростає у протягом дні й знижується вночі. Ритм кортизола причина недостовірних результатів тесту на толерантність глюкозі, проведеного у другій половині дня. Через це референтні інтервали зазвичай встановлюють при дослідженнях між 7 і 9-те годинами ранку. На циркадном ритмі можуть відбиватися впливу індивідуальних ритмів — їжі, сну, фізичної активності. Ці впливи годі було плутати зі справді циркадными коливаннями. У окремих випадках треба враховувати сезонні впливу. Так, зміст трийодтироніну (Т3) на 20% нижче влітку, ніж узимку, тоді як 25-ОН-холекальциферол знаходять у більшої концентрації летом.

Аналиты можуть змінюватися в протягом менструального циклу. Статистично важливих змін аналитов можуть бути викликані коливаннями рівнів гормонів при менструації. Так, концентрація альдостерона в плазмі визначається вдвічі вищий перед овуляцией, ніж у фолликулярной фазі. Подібною, ренин може проявити преовуляторное підвищення. Навіть холестерин піддається суттєвому зниженню при овуляції. Навпаки, фосфати і залізо знижуються при менструации.

Выбор часу стосовно діагностичним і лікувальним процедурам. Багато діагностичні процедури здатні впливати на результати лабораторних досліджень. Щоб запобігти такий вплив, взяття проб необхідно здійснювати до виконання діагностичних процедур, здатних уплинути результати тесту. Точнісінько як і запровадження лікарських засобів, здатних уплинути результати досліджень, слід призначати після взяття в нього проб крові.

С з іншого боку, під час проведення лікарського моніторингу точний час взяття проби стає дуже важливим для правильна інтерпретація результату дослідження рівня лікарського вещества.

Важные правила вибору часу взяття проб биоматериалов:

По можливості, проби слід брати між 7 і 9-те годині ранку.

Взятие проб має виконуватися через 12 годин після останнього приймання їжі.

Взятие проб має виконуватися до проведення діагностичних і лікувальних процедур, здатних уплинути результати тесту.

В разі проведення лікарського моніторингу треба враховувати наявність піка концентрації після запровадження лікарського препарату і фазу стійкого стану перед запровадженням наступній дози препарату.

Всегда слід отмчать точне час взяття проби у документах.

Но:

Анализ проби, взятій ні в час, можуть бути гіршими, ніж відсутність аналізу взагалі.

Проба, результат аналізу якої надходить занадто пізно, узята даремно.

Транспартировка і хранение

Влияния часу й температури при транспортуванні. Передача проб до лабораторії може здійснюватися різними шляхами. Зазвичай проби передаються за стислі терміни, якщо лабораторія розташована поблизу чи самої клініці і навіть немає ніяких проблем. Проте інтервал часу від часу взяття проби крові до її центрифугування не повинен превышать1 годину. Виконання деяких аналітичних процедур вимагає використання таких спеціальних добавок, наприклад, фторид натрия/оксалат для кількісного визначення лактату чи натрий-борат серина ЭДТА для визначення аміаку. Визначення вимагає обережного роботи з пробою ЭДТА крові. Передача проб до лабораторії можна здійснити з кур'єром чи використанням пневматичною пошти. Найкращі системи останнього типу забезпечують бережну транспортування проб, не що викликає гемолізу. Такі проби може бути використовуватимуться визначення аналитов у клінічній хімії, гематології або заради проведення аналізу газів крові. Якщо з технічних причин потрібно транспортування проб великі відстані, (наприклад, поштою чи через лабораторного кур'єра), то використання проб цільною крові має бути виключено.

Высвобождение калію з еритроцитів при кімнатної температурі мінімально внаслідок температурної залежності активності Na+K+ -АТФ-азы. Цей ефект посилюється при 4 °З повагою та понад 30 °З. Концентрація глюкози на підвищення температури знижується, тоді як щодо явище, оскільки його концентрація підвищується під впливом активності фосфатаз в сироватці і эритроцитах.

В пробах крови, полученных патологією, можуть спостерігатися можна побачити під впливом часу й температури. При лейкоцитозе залежне від чинника часу зниження концентрації глюкози ще більш виражено. Аналогічно, концентрації аміаку посилюється Y-глютамилтрансферазы. Зміна кількості клітин крові вплив залежності самих антитіл від температури.

Содержание багатьох клинико-химических аналитов, як-от електроліти, субстрати чи ферменти, може змінюватися при пересилання проб поштою тривалістю до запланованих 4 днів. Концентрація гемоглобіну і кількість еритроцитів також залишаються стабильными.

При пересилання крові чи інших біологічних рідин, узятих від чоловіка, у віддалену лабораторію повинні дотримуватися суворі правила безпеки. З іншого боку, необхідно забезпечити цілісність проби у тому, щоб результат аналізу було б правильним. Зразки, що надсилаються поштою, повинні «бути стійкими до перебігові вмісту, ударам, змін тиску та інших впливам, які можуть виникнути при звичайній транспортировке».

10 правив і деякі рекомендации

Процедура визначається стабільністю компонентів проби. Найважливіші причини порушення якості зразка такі:

Метаболизм клітин крові.

Испарение/сублимация.

Химические реакції.

Разрушение мікробами.

Осмотические процеси.

Воздействие світла.

Диффузия газу.

Быстрая транспортування і стислі терміни зберігання покращують достовірність результатів лабораторних досліджень.

Образцы і проби зберігаються тим краще, що нижчою температура їх збереження зберігання (але, зауважте, існують винятку!).

Образцы і проби завжди повинні зберігатися в закритих посудинах (випаровування!).

Опасность випаровування є і в холодильниках (конденсація вологи на охолоджуючих елементах).

Проблемы зберігання зменшуються при використання одноразових систем для збору проб.

Разделительные елементи (наприклад, розділювальні гелі) покращують вихід сыворотки/плазмы й дозволяють залишати сироватку в первинних пробірках над згустком.

Избегайте струшування ємностей із пробами (системи пневматичною доставки пробірок!): ризик гемолізу.

Всегда бережете судини з кров’ю в вертикальному становищі; процес згортання пришвидшується.

Маркируйте інфікована матеріал і звертайтеся з нею з особливою обережністю.

Список литературы

Для підготовки даної роботи було використані матеріали із сайту internet.