Влияние эссенциальных фосфоліпідів на структурно-функціональну організацію клітинних мембран тромбоцитів в хворих на ішемічну хворобу сердца

Работа виконано Тюменської державній медичній академии.

Наукові керівники: доктора медичних наук, професор Медведєва І.В. доктора медичних наук, професор Шалаев С.В.

Офіційні опоненти: доктора медичних наук, професор Гапон Л. И. кандидат медичних наук, доцент Ковальчук Є.І.

Провідна організація: Інститут харчування РАМН.

Захист дисертації відбудеться 10 квітня 1998 р. в ____ годин на засіданні дисертаційного ради До 084.48.02 в Тюменської державній медичній академії (625 023, р. Тюмень, вул. Одеська, 54).

З дисертацією можна ознайомитися у бібліотеці академии.

Автореферат розісланий «10» березня 1998 года.

Вчений секретарь.

дисертаційного совета.

доктора медичних наук, професор Дурыгин А.Н.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

? -ТФ — ?-токоферол.

БАД — біологічні активні добавки до пище.

ГМК — гладко м’язові клетки.

ДК — диеновые конъюгаты.

ІМТ індекс маси тела.

ЛЗ — липопротеиды.

ЛПВП — ліпопротеїди високої плотности.

ЛПНП — ліпопротеїди низькою плотности.

ЛПОНП — ліпопротеїди дуже низької плотности.

ЛФХ — лизофосфотидилхолин.

МДА — малоновый диальдегид.

МНЖК — мононенасыщенные жирні кислоты.

ОФЛ — загальні фосфолипиды.

ОХС — загальний холестерин.

ПНЖК — полиненасыщенные жирні кислоты.

СТАТЬ — перекисне окислювання липидов.

СОД — супероксиддисмутаза.

СФМ — сфингомиелин.

ТГ — триглицериды.

Тр — тромбоциты.

Тхтромбоксан.

ФАТ — чинник, активуючий тромбоциты.

ФГфибриноген.

ФМ — фосфоинозитол.

ФЛ — фосфолипиды.

ФС — фосфатидилсерин.

ФХ — фосфатидилхолин.

ФЭА — фосфатидилэтаноламин.

ТБК тиобарбитуровая кислота.

ХС — холестерин.

ЩО — підстави Шиффа.

СПІЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Актуальність теми зумовлена зокрема високою захворюваністю, інвалідністю і смертністю від ІХС як серед літніх осіб, і серед осіб у віці (1994; Грацианский Н. А. 1996; Константинов В. В. з співавт., 1997; Wilson, 1994; Chen, 1995). Наявність кількох чинників ризику підвищить ймовірність розвитку захворювання та його ускладнень (Stamler J. et al., 1993; Kwiterovich P.O.Jr., 1995; Watts et al., 1995). Проведені раніше дослідження свідчить про важливому значенні чинників ризику ІХС, як у межах первинної, і вторинної профілактики ІХС (Broun et al., 1990; NCEP, 1994; Smith et al., 1995). Значимість своєчасної діагностики, лікування та профілактики профілактики атеросклеротического поразки серцево-судинної системи та чинників ризику ІХС безсумнівно представляється найважливішої проблемою сучасної кардиологии.

Патології тромбоцитарного ланки гемостазу поруч із порушеннями ліпідного обміну належить провідна роль патогенезі атеросклерозу (Балуда М. В. з співавт., 1990; Грацианский Н. А., 1996; Coller, 1995). Тр беруть участь й у патогенезі стабільної стенокардії напруги (Канская Н.В. з співавт., 1990; Орлов В. М. з співавт., 1990). У основі посилення функціональної активності Тр лежить підвищення упорядкованості і орієнтованості мембранних ФЛ і збагачення їх ХС, своєю чергою «жорсткість» мембран Тр залежить від інтенсивності СТАТЬ та накопичення грошових метаболітів, і навіть активності антиоксидантной системи (Шалаев С.В., 1993; Шатилина Л. В., 1993; Закилов О. Н., 1996).

Атеросклероз — це складного процесу, та розвитку під впливом різних чинників, чимало з яких можуть змінюватися під впливом складу дієти і його калорійності (Погожева А.В., 1995, 1996; Watts et al., 1992; Reaven, 1996).

Проміжної щаблем між гиполипидемической дієтою і застосуванням гиполипидемических препаратів можуть бути БАД, зокрема фосфолипидной природи (Тутельян В.А., 1995; Березовикова І.П., 1995; Попова Ю. П. з співавт., 1997).

Нова технологія отримання нативных ФЛ, застосовуваний під час виготовлення концентрату «Вітол», дозволяє зберегти майже всі біологічні активні компоненти. «Вітол» — це концентрат нативных ФЛ рослинного походження, представлених найціннішою фосфатидилхолиновой фракцією (?40%) з мінімальним концентрацією лизофракций (Самсонов М.А. з співавт., 1995, 1997; Бутина Е. А. з співавт., 1995).

Мета роботи — вивчення впливу комплексу нативных фосфоліпідів, застосовуваних ролі БАД, на клінічні прояви й структурно-функціональну організацію клітинних мембран тромбоцитів в хворих на ішемічну хворобу сердца.

Завдання исследования.

1. Досліджувати основні структурні параметри клітинних мембран кров’яних платівок в хворих ІХС з клінічними проявами стабільної стенокардии.

2. Оцінити активність процесів СТАТЬ, і навіть ферментативного і неферментативного ланок антиоксидантной захисту у тромбоцитарних мембранах в хворих ИБС.

3. Вивчити вплив чинників ризику ІХС на липидную структуру і окисний метаболізм у клітинних мембранах тромбоцитов.

4. Дати оцінку терапевтичної ефективності фосфолипидного продукту «Вітол» в хворих ІХС з клінічними проявами стабільної стенокардії II-III ФК.

5. Дати характеристику впливу нативных фосфоліпідів на структурно-функціональну організацію клітинних мембран тромбоцитів в хворих ІХС з урахуванням наявних чинників риска.

Наукова новизна Через війну дослідження вперше встановлено, що з хворих ІХС, стабільної стенокардією порівняно з здоровими особами, у клітинних мембранах Тр спостерігаються мембранопатологические зміни, які характеризуються збільшенням змісту ЛФХ, ОХС, коефіцієнта ОХС/ОФЛ. Паралельно реєструється активація СТАТЬ тлі зниження рівня ?-ТФ в липидном бислое тромбоцитарних мембран.

У процесі дослідження вперше доведено, що наявність трьох чинників ризику ІХС, як куріння, ожиріння, надлишкове споживання тварин жирів, гіперхолестеринемія, і навіть вік (старше 50) років погіршує порушення структурно-функциональной організації мембран тромбоцитів в хворих стабільної стенокардией.

Під час вивчення ефективність використання фосфолипидного концентрату «Вітол» вперше встановлено, що це БАД, крім зниження ОХС плазми, має мембраностабилизирующими і антиоксидантными властивостями. Мембраностабилизирующее дію «Витола» проявляється у збільшенні всіх основних фракцій фосфоліпідів, зниженні ОХС і співвідношення ОХС/ОФЛ в мембранах Тр. Антиоксидантное дію залежить від достовірному зниженні первинних (ДК) і кінцевих (ЩО) продуктів СТАТЬ і статистично значимому збільшенні ?-ТФ в липидном бислое тромбоцитарних мембран.

Мембраностабилизирующий і антиоксидантний ефекти БАД «Вітол» найбільше виражені в хворих ІХС віком від 50 років, з ожирінням, надлишковим споживанням тварин жирів в анамнезі і вихідним рівнем ОХС плазми більш 6,2 ммоль/л.

Практичне значення У процесі дослідження встановлено, що найбільших змін в тромбоцитарном ланці гемостазу в хворих стабільної стенокардією спостерігаються за наявності трьох чинників ризику як куріння, ожиріння, надлишкове споживання тварин жирів і гіперхолестеринемія. Виходячи з цього, даний контингент хворих потребує проведенні профілактичних заходів, вкладених у корекцію зазначених нарушений.

Нативні фосфоліпіди, які у препараті «Вітол», надають гиполипидемическое дію, мають мембраномодулирущими і антиокидантными властивостями. Ця БАД найефективніша в хворих ІХС з ожирінням, зловживанням тваринами жирами, гіперхолестеринемією, на більш старшої вікової группе,.

Отримана інформація має важливого значення з розробки методів лікування та профілактики профілактики атеросклерозу і ИБС.

Впровадження в практику. Результати дослідження використовують у роботі відділення кардіології 2 ДКБ і кафедри госпітальної терапії з курсом ендокринології ТГМА, впроваджено у практику амбулаторного лікування хворих, перенесли інфаркт міокарда, в клініці НДІ КПК ЗІ РАМН (г.Тюмень).

Основні становища, винесені на защиту:

1. У клітинних мембранах тромбоцитів за умови стабільності стенокардії напруги існують зміни липидной структури, процесів СТАТЬ і стан антиоксидантной захисту за порівнянню із здоровими лицами.

2. Дані зміни липидной фази мембран тромбоцитів в хворих стабільної стенокардією поглиблюються за наявності чинників ризику (прогресування) ІХС (артеріальна гіпертонія, куріння, ожиріння, надлишкове споживання тварин жирів, вік, рівень загального ХС плазмы).

3. Концентрат нативных фосфоліпідів «Вітол» надає комплексне вплив: має гипохолестеринемическим дією, впливає на структурні параметри, процеси липопероксидации і антиоксидантну захист у клітинних мембранах тромбоцитів в хворих ІХС, стабільної стенокардией.

4. Найбільша ефективність препарату «Вітол» проявляється в хворих ІХС з ожирінням, надлишковим споживанням жирів, гіперхолестеринемією, у старшій віковій групі і в курців больных.

Апробація роботи відбулася 18 лютого 1998 р. спільне засідання проблемної комісії «Медико-соціальні і общебиологические проблеми здоров’я населення Западно-Сибирского территориально-промышленного комплексу» і кафедри госпітальної терапії з курсом ендокринології ТГМА. Фрагменти роботи було повідомлено на виставці «Медицина і душевному здоров'ї» (Тюмень, 10−13 вересня, 1996 р.), конференції, присвяченій 20-річчю 2ГКБ (Тюмень, грудень, 1997), конференції із лікування серцево-судинних захворювань (Current concepts in the therapy of coronary heart disease. The second update on experimental results and clinical interventions/ Garmich-Partenkirchen, Germany. January, 28−31, 1998).

Публікації: По темі дисертації опубліковано 5 работ.

Структура і обсяг дисертації: Дисертація викладено на… сторінках машинопису, складається з запровадження, огляду літератури, 3 глав власних досліджень, обговорення результатів і висновків, практичних рекомендацій та списку літератури. Робота містить… таблиць і… рисунков.

МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Об'єктом дослідження були 107 хворих ІХС з клінічними проявами стабільної стенокардії II-III ФК без важких ускладнень (99 чоловіків, 8 жінок, середній вік 53,9?6,6 р.); їх у 65 хворих проводили дослідження терапевтичного і метаболічного ефектів фосфолипидного продукту «Вітол»; 42 хворих склали групу порівняння. Контрольна група складалася з 44 практично здорових осіб — донорів (37 чоловіків, і 7 жінок, середній вік 50,2?1,3 г.).

Усім хворим проводилися узвичаєні методи клінічного обстеження. У проведення дослідження хворі не отримували аспірин, і навіть гіполіпідемічні средства.

Спеціальні методи исследования.

1. Виділення тромбоцитів методом К. В. Чурина (1991 р.) також приготування ліпідних екстрактів з суспензії тромбоцитов.

2. Визначення змісту фосфоліпідів методом тонкослойной хроматографії (В.І. Крилов з співавт., 1978; М. Мейгс, 1975).

3. Визначення загального холестерину методом Златкиса-Зака.

4. Продукти СТАТЬ: ЩО визначалися методом Bidlack, Ф. З. Меерсон (1979); ДК — методом В. В. Гаврилова (1988); ТБК-продукты (МДА) — методом І.Дз. Сталевий (1977).

5. Показники антиоксидантной захисту: ?-ТФ (М.М. Рудакова-Шилина, 1982); СОД (В.П. Верболович, Л.И. Підгорної, 1987); каталаза (M. Karen, Toth et al., 1986; Є. Дубініна з співавт., 1988).

Статистичне опрацювання данных.

Матеріал дисертації оброблений на персональному комп’ютері Pentium — 100 з допомогою пакета статистичної обробки даних «Armstat». Статистичне опрацювання здійснювалася з допомогою t критерію Стьюдента для парних і непарних величин. У обробці даних також застосовувалася кореляційний аналіз. Достовірність подсчитывалась з точністю до 0,001. У цьому достовірними вважали відмінності за значення p.

РЕЗУЛЬТАТИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Особливості ліпідного складу і СТАТЬ в мембранах тромбоцитів в хворих ИБС.

У хворих стабільної стенокардією порівняно з здоровими особами, у клітинних мембранах Тр виявлено достовірне (p25кг/м2) було встановлено достовірне (p.