Класс жгутиковые: лейшмании, трихомонады, лямблії, трипаносомы

САМАРСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНИВЕРСИТЕТ.

Курсова робота Тема: «Клас жгутиковые: лейшмании, трихомонады, лямблії, трипаносомы.».

Виконавець: студентка I курсу факультету наднормативного образования.

Баринова Ю.Ю.

Проверил:

Аршина С.Г.

Сизрань 2000 год.

План I. Загальна характеристика найпростіших. II. Клас жгутиков. III. Лейшмании: 1. Види 2. Будова 3. Цикл розвитку 4. Джерела інфекції 5. Клініка 6. Діагностика 7. Профілактика IV. Трипаносомы: 1. Будова 2. Життєвий цикл 3. Клініка 4. Діагностика V. Лямблії: 1. Будова 2. Цикл розвитку 3. Клініка 4. Діагностика VI. Трихомонады: 1. Види 2. Будова 3. Клініка 4. Диагностика.

Найпростіші Численні види одноклітинних організмів по сучасної зоологічної класифікації ставляться до подцарству найпростіших. Частина веде паразитичний спосіб життя. Тіло найпростіших складається з цитоплазми, ядра, різних органел, які забезпечують функції харчування, руху, виділення. Найпростіші пересуваються з допомогою псевдоподий (саркодовые), жгутиков і ундулирующих мембран (жгутиконосцы), ресничек (ресничные інфузорії). Їжею одноклітинним служать органічні частки, зокрема і живі мікроорганізми, і навіть розчинені у довкіллі живильні речовини. Найпростіші деяких видів здатні инцистироваться, т. е. вони округляються і покриваються щільною оболонкою. Цисти стійкіші до впливу несприятливих зовнішніх чинників, ніж вегетативні форми. При потраплянні у сприятливі умови найпростіші виходять із цисти і починають розмножуватися. Розмноження відбувається безстатевим (поперечне, поздовжнє і множинне розподіл) і статевим шляхом. Найпростіші багатьох видів, провідні паразитичний спосіб життя, розмножуються послідовний у кількох господарів. Наприклад, малярійний плазмодий проходить цикл розвитку на тілі комара й у людини. Найпростіші, котрі живуть в людини, ставляться до чотирьох класам: саркодовые; жгутиконосцы; споровики, ресничные інфузорії. Класи поділяються на загони, сімейства, пологи (схема 1). Останні включають чи кілька видов.

[pic].

КЛАСС.

ЖГУТИКОНОСЦЫ (МАSТ1G0РНОRА).

Основне відмінність найпростіших цього — наявність одній із стадій розвитку однієї чи кількох жгутиков. У тілі жгутиконосцев біля підніжжя джгута є особливий органоид—кинетопласт, функція якого пов’язані з виробленням енергії для руху джгута. В окремих жгутиконосцев одне із жгутиков проходить вздовж тіла, і соединён з нею тонкої перетинкою, створюючи волнообразную (ундулирующую) мембрану. Остання забезпечує поступальний рух простейшего.

З численних видів даного класу в людини мають найбільше патогенне значення лейшманий і трипаносомы. Передаються вони людині через кровососущих переносників (москіти, мухи це-ці та інших.). Інші представники класу жгутиконосцев —• лямблії — живуть кишечнику, а різні види трихомонад — в кишечнику, ротовій порожнині і сечостатевих шляхах. Поширені ці найпростіші дуже широко.

Лейшмании.

Виды.

Розрізняють три виду лейшманий, паразитуючих в людини. Leishmania tropica викликає в людини шкірний лейшманиоз. Цей паразит уперше виявлено російським лікарем й ученим П. Ф. Боровським (1897).

Вирізняють дві форми шкірного лейшманиоза — антропонозную (міську) і зоонозную (пустельну). Leishmania brasiliesis є у Америці і викликає кожно-слизистый (американський) лейшманиоэ. Leishmania donovani вражає внутрішніх органів, тому захворювання називається висцеральным (внутрішнім) лейшманиозом. Лейшмании цього виду названі під назвою англійських учених, вперше які виявили в селезінці хворих людей Індії [Лейшман (1900) і Донован (1903)]. Розрізняють дві основні географічні форми: середземноморський вісцеральний лейшманиоз, зустрічається й у СРСР, і індійський кала-азар.

Строение.

Лейшмании свого розвитку проходять стадії. Безжгутиковая форма має овальне тіло довжиною 2—6 мкм. Ядро округле, займає до 1/3 клітини. Поруч з нею перебуває кинетопласт, має вид короткій палочки.

При забарвленні по Романовському цитоплазма серовато-голубая, блакитна чи голубовато-сиреневая, ядро — красно-фиолетовое, кинетопласт забарвлюється інтенсивніше, ніж ядро (рис. 1).

[pic].

Рис. № 1 Leishmania donovani (А) 1 лейшмания свободнолежащая, 2 лейшмании внутрішньоклітинні, 3 еритроцит, 4 нормобласт, 5 промиелоцит. Leishmania tropika (Б) 1 лейшмания свободнолежащая, 2 лейшмании внутрішньоклітинні, 3 еритроцит, 4 нейтрофил, 5 лімфоцит. Лейшмании в цій стадії нерухомі, жгутиков немає. Зустрічаються в тілі хребетного хазяїна (людина, собаки, гризуни), паразитують внутриклеточно в макрофагах, клітинах кісткового мозку, селезінки, печінки. У однієї ураженої клітині можуть утримувати за кілька десятків лейшманий. Розмножуються простим розподілом. Жгутиковая форма рухлива, має жгутик довжиною 15—20 мкм. Форма тіла подовжена, веретеноподібна, довжиною до 10—20 мкм. Розподіл поздовжнє. Розвивається у тілі беспозвоночного хазяїна — переносника (москіта). У культурі на поживних середовищах також розвиваються жгутиковые форми лейшманий.

Цикл развития.

Паразитуючи в людини і спроби деяких тварин, можуть міститися у крові й шкірі. Москіти, дрібні комахи, насмоктавшись крові хворих людей або тварин, заражаються лейшманиями.

Уперше добу заглоченные безжгутиковые паразити перетворюються на рухливі жгутиковые форми, починають розмножуватися навіть через 6—8 днів нагромаджуються у горлянці москіта. При укусі людини заражених москітом рухливі форми лейшманий з його горлянки пробираються у ранку і далі впроваджуються у клітини шкіри чи внутрішніх органів залежно від виду лейшманий. Тут відбувається їх перетворення на безжгутиковые форми.. [pic].

Рис № 2 Собака, вражена висцеральным лейшманиозом.

Джерела инфекции.

На можливу роль собак як джерела інфекції при середземноморському висцеральном лейшманиозе вперше зазначив французький вчений Ш. Ніколь, а підтвердили це радянські вчені М. І. Ходукин і М. З. Софиев. Крім собак, джерелом інфекції можуть і деякі дикі тварини (шакали, дикообразы, лисиці). При індійському лейшманиозе (кала-азаре) джерелом інфекції є хворими людьми. У собаки, ураженої висцеральным лейшманиозом (рис. 2), розвивається виснаження, з’являються виразки вся її голова і шкірі тіла, масштабування шкіри, особливо навколо очей. У цьому важливо враховувати, що якщо в молодих собак захворювання може протікати гостро і навіть приводити їх загибель, те в дорослих тварин перебіг хвороби нерідко більш стерте і навіть бессимптомное (носительство).

У СНД вісцеральний лейшманиоз зустрічається спорадично у Середній Азії, на півдні Казахстану й у Закавказзі. При шкірному лейшманиозе джерелом інфекції є хворими людьми чи, як це вперше засвідчив у 1937—1940 рр. М. І. Латишев, дикі гризуни (при зоонозной формі, «пендинской виразкову хворобу»). Основними хранителями лейшманий є велика піщанка (рис. 3) і краснохвостая піщанка. Зоонозный шкірний лейшманиоз зустрічається у багатьох оазах південній частині Туркменії і Узбекистані. Передача цього лейшманиоза іноді йде настільки інтенсивно, що місцеві переболевают їх чекає ще у віці. Життєві цикли лейшманий представлені на рис. 4 і 5.

[pic].

Рис. № 3. Велика песчанка.

[pic] Рис № 4 Життєвий цикл Leishmania donovani.

[pic] Рис № 5 Життєвий цикл Leishmania tropika.

Клиника.

Висцеральным лейшманиозом частіше хворіють діти. Після інкубаційного періоду тривалістю від кількох основних тижнів за кілька місяців хворого підвищується температура тіла, у розпал хвороби сягала 39—40°С, з’являється млявість, адинамия, блідість, зникає апетит, збільшується, іноді різко, селезінка і печінку, унаслідок чого помітно виступає живіт (рис.№ 6).

[pic].

Рис № 6 Дитина, хворий висцеральным лейшманиозом.

Розвиваються анемія і виснаження больного.

Захворювання тягнеться кілька місяців, і за відсутності лікування зазвичай закінчується смертю, безпосередньої причиною якої часто є такі ускладнення, як пневмонія, диспепсия.

При зараження людини збудником шкірного лейшманиоза після інкубаційного періоду від 1— 2 нед за кілька місяців (при зоонозном типі цей період зазвичай короткий) у місцях укусів москітів з’являються невеликі пагорбки. Вони буровато-красноватого кольору, середньої щільності, зазвичай малоболезненные. Пагорбки поступово збільшуються і далі изъязвляются — через 3— 6 нед при антропонозной форми і через 1—3 нед при зоонозной. Виникають виразки з набряком оточуючої тканини, запаленням і збільшенням лімфатичних узлов.

Процес тягнеться кілька місяців (при антропонозной форме—больше року), закінчуючи одужанням. На місці виразок залишаються рубці. Після перенесеного захворювання формується стійкий иммунитет.

Диагностика.

При постановці клінічного діагнозу вищезазначені основні симптоми захворювання є опорними. Слід враховувати епідеміологічні дані (проживання неблагополучних по лейшманиозу місцях тощо.). Остаточний і достовірний діагноз висцерального лейшманиоза ставиться виходячи з виявлення возбудителя.

Дослідження пунктата кісткового мозга.

З метою виявлення збудника висцерального лейшманиоза, а ряді випадків та інших найпростіших досліджують кістковий мозг.

Кістковий мозок отримують, пунктируя гребінь клубової, голівку великогомілкової кістки чи грудину. В усіх випадках пункція є відповідальної процедурою і роблять лише лікарем. Отриманий при пункції мозок поміщають на предметне скло і, обережно розмазуючи тонким шаром з допомогою шліфованого скла, готують мазок. При значної домішки крові в пунктате на склі знаходять маленькі білі грудочки та їх мазки.

Фіксація мазка. Мазок сушать надворі, фіксують 30 хв за абсолютним этиловом спирті чи 5 хв в метаноле (метиловом спирті), знову висушують надворі. Фіксовані мазки можна зберігати до забарвлення кілька дней.

Забарвлення мазка. Скла вкладають мазками догори на скляні палички в фотокювете. На всю поверхню мазка наливають розведену в фосфатном буфері (рН 6,9—7,1) фарбу Романовського на 30—50 хв. Тривалість забарвлення залежить від температури приміщення — у теплому вона менше, в холодному — більше. Після забарвлення препарат обполіскують дистильованої водою (чи кип’яченою) і висушують. Досліджують під иммерсией.

Оцінка результатів. У розпал хвороби лейшмании можуть виявлятися легко. У ранній стадії й у лікування потрібно понад тривалий перегляд мазка — щонайменше 40 мин.

У препаратах лейшманий можуть бути групами чи поодинці, як внутриклеточно, і поза клітин на зв’язки Польщі з руйнацією їх під час приготування мазка. При шкірному лейшманиозе досліджують мазки з не распавшихся горбочків або з інфільтратів поблизу язв.

Пункція шкірних поразок і лімфатичних узлов.

У певних хворобах протозойной етіології, наприклад, шкірному лейшманиозе, досліджують матеріал з шкірних поразок, а деяких випадках досліджують пунктат лімфатичних вузлів (лейшманиоз, трипаносомоз, токсоплазмоз).

При шкірному лейшманиозе мазки готують з не распавшихся горбочків і виразок. Шкіру у сфері горбка протирають спиртом, двома пальцями злегка здавлюють і голкою чи кінчиком скальпеля роблять прокол чи поверховий надріз. З яка виступила серозно-кровянистой рідини готують на матеріальному склі мазок.

За наявності виразок матеріал брати безпосередньо їх категорично не рекомендується, оскільки наявність мікрофлори і залишків зруйнованих клітин утрудняє пошуки лейшманий. Тому після попередньої обробки шкіри спиртом область навколо виразки стискають двома пальцями в зоні інфільтрату краєм виразки роблять прокол голкою чи поверховий розріз скальпелем. Для приготування мазків використовують краплю серозно-кровянистой рідини чи отриманий при поскабливании скальпелем краєм розтину матеріал. Мазки сушать надворі, фіксують сумішшю Никифорова і фарбують по Романовскому.

Оцінка результатів. У препараті повинні прагнути бути добре помітні клітини інфільтрату — макрофаги, ендотеліальні, плазматические, лимфоидные клітини, фибробласты й невеличка домішка клітин периферичної крові. Наявність у препараті епітеліальних клітин, бесструктурных глыбок, окрашивающихся в рівномірно бузковий колір, означає, що зіскрібок узяли поверхово і може бути повторений. У мазку повинно бути занадто багато крові, і навіть гною і бактерій. Лейшмании виявляються макрофагах, і навіть поза клітин на вигляді округлих, овальних чи видовжених тілець розміром 3—5 мкм.

Лейшмании легко виявляються на початкових стадіях виразки. У гнійному отделяемом виразки може бути виявлено лише деформовані і разрушающиеся лейшмании, якими важко поставити діагноз. На стадії загоєння виявляються редко.

Пункція збільшених лімфатичних вузлів зазвичай проводиться лікарем з допомогою ін'єкціях голки після відповідної обробки шкіри. Вузол притримують рукою, вміст через голку насасывают шприцом і завдають на предметне стекло.

Нерідко застосовують метод посіву крові хвору чи матеріалу зі шкірних поразок чи кісткового мозку на середу, яка готується з агару з додаванням дефибринированной крові кролика. У позитивному разі на 2— 10-ї день була в культурі з’являються жгутиковые форми лейшманий.

Профилактика.

Профілактичні заходи вибираються стосовно виду лейшманиоза. При лейшманиозе проводять подвірні обходи для раннього виявлення хворих, організують систематичне знищення бездоглядних собак і огляди зареєстрованих собак цінних порід (мисливські, сторожові, службові тощо.). При антропонозной формі шкірного лейшманиоза основним профілактичним заходом є виявлення і лікування хворих людей. При зоонозной формі організують винищування диких грызунов.

Надійним засобом індивідуальної профілактики є щеплення живої культури жгутиковых форм. Важливим розділом боротьби з всіх видів лейшманиоза служить знищення москітів і запобігання від їх укусов.

Трипаносомы.

Строение.

Для людини патогенны три виду з цієї родини Trypanosoma, причому два виду викликають африканський трипаносомоз (сонну хвороба) і тільки вид —американський трип аносомоз (хвороба Шагаса).

Тіло трипаносом довгасте, вузьке, має жгутики і ундулирующую мембрану. Довжина тіла 17—28 мкм. Переносником збудників африканського трипаносомоза є мухи роду Glossina, чи це-ці (рис.№ 7 і побачили 8-го).

[pic].

Рис. № 7 Життєвий цикл Trypanosoma rhodesiense.

[pic].

Рис № 8 Життєвий цикл Tripanosoma gambiense.

Хвороба Шагаса переноситься триатомовыми клопами (рис. 9).

[pic].

Рис № Життєвий цикл Trypanosoma cruzi.

Клініка. Під час нападу на людини зараженого переносника трипаносомы пробираються у кров, потім — у внутрішніх органів і центральну нервову систему, що й розмножуються. У хворих підвищується температура тіла, з’являється висип на тілі, збільшуються лімфатичні узлы.

При сонної хвороби уражається центральна нервова система, розвивається менінгоенцефаліт, зазвичай що призводить хворого загибель після закінчення кількамісячної чи лет.

Хвороба Шагаса — захворювання, вражаюче внутрішніх органів, серцевий м’яз, головний мозок. У СНД можуть виявлятися лише завізні випадки трипаносомозов.

Диагностика.

При Африканському трипаносомозе паразитологическое дослідження має особливості, залежать від стадії. Збудника можна знайти в початковий період захворювання дома укусу зараженої мухою це-ці, а й у периферичної крові. У пізній період лихоманки чи з закінченні його трипаносом виявляють в пунктате збільшених лімфатичних вузлів. У період прояви симптомів поразки центральної нервової системи паразитів, у крові та в лімфатичних вузлах немає. І на цій стадії хвороби ефективніше дослідження спинномозковій жидкости.

[pic] Для виявлення трипаносом досліджують свіжі чи забарвлені препарати. У першому випадку краплю крові, змішану з цитратом, пунктат лімфатичного вузла чи спинномозковій рідини поміщають на предметне скло, накривають покровным склом і микроскопируют. Рухливих трипаносом можна побачити навіть за малому збільшенні мікроскопа, хоча краще від їхніх видно при великому збільшенні. Більше поширена дослідження постійних забарвлених по Романовському препаратів, навіщо готують мазки і товсті краплі звичайним способом. У забарвлених препаратах трипаносомы легко розпізнаються серед клітинних елементів. При забарвленні по Романовському тіло трипаносом забарвлюється в блакитнуватий колір, ядро і джгути— в червоний. На препараті можна побачити мембрану, з'єднуючу хвилеподібно звивистою жгутик з краєм тіла. Якщо свіжих чи забарвлених препаратах вдається знайти збудника, використовують метод зараження лабораторних тварин. Найбільш чутливі до зараженню трипаносомами білі миші, які мають після введення досліджуваного матеріалу підшкірно чи внутримышечно вже в 2—3-й день була в крові з’являються паразиты.

При американському трипаносомозе збудник знаходять у гострої стадії хвороби і периферичної крові в свіжих чи забарвлених по Романовському препаратах. Однак, порівняно з африканської формою хвороби число трипаносом тут значно менше, тому потрібно переглядати велика кількість препаратів. У хронічної стадії паразити у крові зустрічаються дуже рідко, тому дослідження периферичної крові буває малоефективним. У разі рекомендується зараження білих мишей чи морських свинок, і навіть посіви на живильні середовища. З метою діагностики використовують серологические реакції: зв’язування комплементу, аглютинації, флюоресцирующих антител.

Лямблии.

Строение.

Лямблия (Lamblia intestinalis) уперше було описана російським ученим Д. Ф. Лямблем (1859), на вшанування яку вона і має свою назву. Лямблия існує у вигляді вегетативної форми (трофозоит) і цисти (рис. 10). Вегетативна форма активна, рухлива, грушоподібна, передній кінець тіла закруглений, задній загострений. Довжина 9—18 мкм. У передній частини тіла перебуває присасывательный диск як поглиблення. Має 2 ядра, 4 пари жгутиков. Жгутики, проходячи частково в цитоплазмі, утворюють два добре видимих при забарвленні поздовжніх пучка. [pic].

Рис № 10 Лямблії При спостереженні в живі рух дуже характерне, паразит все час перевертається боком з допомогою обертального руху навколо подовжньої осі. У препараті при кімнатної температурі лямблії швидко гинуть. Їжу всмоктують всієї поверхнею. Розмножуються подовжнім розподілом. Цисти — це нерухомі неактивні форми паразита. Довжина 10—14 мкм. Форма овальна. Оболонка порівняно товста, добре окреслена, часто в значної своєї частини хіба що отслоена від тіла самої цисти. Цей ознака допомагає відрізняти цисти лямблий з інших подібних утворень. У розчині Люголя офарблюються в желтовато-коричневатый колір. Забарвлення дозволяє вбачати у реформі зрілої цисте 4 ядра.

Цикл развития.

Живуть у верхній відділі тонкого кишечника. З допомогою присасывательного диска прикріплюються до ворсинкам. У жовчному міхурі лямблий не живуть, оскільки жовч ними діє згубно. Часто виявлення їх при дуоденальном зондуванні пояснюється лише тим, що лямблий потрапляють у вміст дванадцятипалої кишки з її стінок. Зазвичай вегетативні форми з екскрементами не виділяються, однак за поносах їх можна знайти у свежевыделенных рідких фекаліях. Лямблий, потрапляючи в нижні відділи кишечника, де умови їм несприятливі, перетворюються на цисти, що й виділяються звичайно з екскрементами. Цисти добре зберігаються у зовнішній середовищі, залежно від вологості і оточуючої температури — до місяці; при висушуванні гинуть нас дуже швидко. Зараження може відбутися через забруднені руки, іграшки, їжу, і воду. Цисти, потрапляючи в кишечник, перетворюються там в вегетативні форми. Одна циста утворює дві вегетативні формы.

Клиника.

Лямблії поширені дуже широко, особливо рясно вони зустрічаються у дітей. На думку учених, лямблії, особливо в великому тому числі, можуть викликати механічне роздратування слизової оболонки кишечника, в певної міри ускладнювати всмоктування жирів і жиророзчинних вітамінів. У цьому можуть бути нерізкі біль у животі, розлад стільця, зниження апетиту, іноді біль у правом підребер'я (лямбліоз). У окремих випадках лямблії можуть погіршити протягом інших захворювань кишечника і жовчних шляхів. Ряд учених вважають лямблії непатогенными. Таким чином, питання патогенності лямблії нині остаточно не решен.

Діагностика. Виявити лямблії зараженої людини зазвичай порівняно легко. .

Дослідження желчи.

Жовч і вміст дванадцятипалої кишки, отримані при дуоденальном зондуванні, оглядають і вибирають грудочки слизу на предметне скло і микроскопируют. З іншого боку, матеріал центрифугируют, переглядають під мікроскопом осад. Цим методом можна знайти вегетативні стадії лямблий. У свежевыделенном матеріалі, отриманому при дуоденальном зондуванні, можна знайти рухливі вегетативні формы.

Дослідження испражнений/.

Збір матеріалу. Фекалії досліджують з метою виявлення найпростіших кишечника. Рух найпростіших — одне з характерних і відмітних властивостей, що дозволяє поставити правильний діагноз. Тому основний правило, що слід точно виконувати — це піддавати дослідженню лише свіжий матеріал. Проміжок часу від часу виділення до дослідження ні перевищувати 30 хв., т. е. до лабораторії повинні доставлятися фекалії у теплому вигляді. Під терміном «теплі фекалії» треба розуміти фекалії, не охоловши після виділення з організму, і аж ніяк підігріті штучно. Дослідження оформлених випорожнення допускається в протягом 2 год після выделения.

Обстежуваний матеріал складають у чисту суху посуд. Найбільш підходящими цієї мети є картонні парафинированные склянки, котрі після одноразового використання спалюють. Якщо фекалії складають у скляну чи порцеляновий посуд, та над вживанням її стерилізують шляхом кип’ятіння. Вегетативні форми найпростіших дуже чутливі до хімічним речовин, і тоді як посуді, куди збирають: фекалії, залишаються сліди дезінфікуючих речовин, найпростіші швидко гинуть розпізнавання їх стає важким, котрий іноді неможливим. Доставлений до лабораторії матеріал передусім піддають макроскопическому огляду. У цьому відзначають консистенцію калу, наявність слизу і крові. Якщо лабораторію доставлено одночасно кілька проб фекалій, насамперед підлягають дослідженню неоформлені фекалії з патологічними домішками/ Зберігати пробу до дослідження треба при звичайній температурі в вытяжном шафі. Поміщати в термостат годі було, бо за підвищеної температурі швидше відбувається розмноження бактерій, більше утворюється продуктів метаболізму, що зумовлює швидкої дегенерації найпростіших. При кожному аналізі випорожнення з метою виявлення найпростіших кишечника обов’язковим є дослідження нативного препарату і мазка, пофарбованого розчином Люголя.

Нативний мазок. Рідкі кровянисто-слизистые випорожнення без видимої домішки фекальних мас може бути досліджені не додаючи ізотонічного розчину хлориду натрію. Дерев’яної паличкою краплю випорожнення переносять на предметне скло і накривають покровным склом. Користуватися скляними паличками категорично не рекомендується, оскільки ними неможливо набирати слизові грудочки, у яких містяться найпростіші. Правильно приготовлений препарат може бути охайна, покровное скло має щільно прилягати до предметного з рівномірним розподілом рідини між скельцями без її выступания межі покровного скла. Мазок може бути помірної товщини. Густий мазок малопрозрачен і важко микроскопировать, Якщо ж взято замало фекалій, то мазок вийде розлучених і найпростіших годі й знайти. Через правильно приготовлений мазок може бути видно друкований текст.

Мікроскопічне дослідження свіжого мазка потрібно проводити, обов’язково дотримуючись такі правила:

1) висвітлення препарату повинно бути яскравим. Правильне висвітлення досягається відповідним становищем конденсора, який опускають тим більше коштів, чим сильніший джерело світла. Використовують також светофильтр;

2) препарат переглядають спочатку під малим збільшенням микроскопа.

(X 10), і потім з сухий системою великого увеличения;

3) пересувати препарат треба з такою розрахунком, ніж пропустити будь-які ділянки мазка або потрапити повторно цього разу вже переглянуте место.

При правильному висвітленні навіть під малим збільшенням помітні вегетативні стадії і цисти лямблий. Після орієнтовного перегляду під малим збільшенням обов’язково застосовують велике збільшення (х10, х40).

Циста в нативном мазку відрізняється від вегетативної стадії постійної формою завдяки оболонці. Будова цист в нативном препараті погано помітно, невидны ядра. Тож уточнення виду застосовують мазок, забарвлений розчином «Люголя. Забарвлення розчином Люголя. Розчин Люголя по уніфікованої методиці рекомендується наступного складу: йодид калия—3. р, кристалічний йод— «1,5 р, вода дистильована — 100 мл. Спочатку розчиняють йодид калію, потім йод. Розчин стабільний у темній склянці з притертої корком при кімнатної температурі з місяць. Цисти офарблюються в золотаво-коричневий колір. З огляду на цитоплазми помітні ядра, їх будову та число. Добре видно глікоген, окрашивающийся в різні відтінки коричневого кольору. Методика перегляду препарату, пофарбованого розчином Люголя, така сама, як і нативного мазка. Слід враховувати, що з забарвленні розчином Люголя вегетативні стадії гинуть і визначаються ніяк не. Тож якщо фекалії оформлені, то нативном мазку при мікроскопії (x 400) виявляють цисти. Поєднання методів копроскопии і дуоденального зондування підвищує частоту виявлення лямблиоза.

Слід зазначити, що стала вельми поширеною лямблії (дотримання) нерідко виводить на оману й викликає гипердиагностику лямблиоза. Тому за наявності клінічної картини поразки шлунково-кишкового тракту чи жовчних шляхів необхідно виключити інші можливі їх, наприклад провести бактеріологічні исследования.

Трихомонады.

Виды.

Людина живуть три виду трихомонад (рис. 11):Trichomonas hominis— кишкова, що у товстому кишечнику; Trichomonas tenax— ротова, що у ротовій порожнині; Trichomonas vagimalis— влагалищная, паразитуюча в сечостатевих шляхах. [pic].

Рис № 11. Трихомонады атрихомонада влагалищная, бтрихомонада кишкова, втрихомонада ротовая.

Строение.

Кишкова трихомонада має грушоподібне тіло довжиною 8—20 мкм. Від переднього кінця тіла відходять зазвичай 5 жгутиков. З одного боку тіла по усієї своєї довжині розташована волнообразна; перетинка (ундулирующая мембрана), по зовнішньому краю якої про ходить тонка нитку, виступає своїм вільним кінцем як джгутика. У цитоплазмі при забарвленні видно ядро і осьова нитку. Рух трихомонады активне, безладне, «метушливий». Поруч із поступальним рухом трихомонады обертаються навколо подовжньої осі. Мембрану вдається помітити лише за уповільнення руху трихомонады або за її зупинці як періодично пробегающих хвиль за однією з сторін тіла. Розмножується розподілом. Цист не утворює. Живе в товстому кишечнику людини. У рідких випорожненнях може виявлятися на вельми у великих кількостях. Нерідко грає певну роль розвитку чи погіршенні течії захворювань товстого кишечника, особливо в дітей раннього віку. Ротова трихомонада за будовою справляє враження кишкову, її довжина 6—13 мкм, ундулирующая мембрана не сягає кінця тіла. Цист не образует.

Патогенне значення не доведено, хоч і є даних про значно частішої народження що в осіб з різними захворюваннями ротовій порожнині і зубів (гінгівіт, пародонтоз, карієс зубів) і несприятливої ролі цих найпростіших у підтримці патологічного процесу. Деякі дослідники виявляли трихомонад в мокроті хворих легеневими захворюваннями, і навіть в віддалених хірургічним шляхом бронхоэктазах і абсцесах легких. Усе це змушує звернути увагу до необхідність ширше застосовуючи лабораторних методів дослідження для виявлення ротових трихомонад в стоматологічних і терапевтичних медичних учреждениях.

Трихомонад виявляють при мікроскопії нативных чи забарвлених мазків з соскоба ротовій порожнині (з зубів, ясен, з осередків запалення і нагноєння), в бронхіальної слизу і мокроті. Выявляемость збільшується із застосуванням методів посіву на живильні среды.

Влагалищная трихомонада має грушоподібне тіло довжиною 14—30 мкм (див. рис. 12).

[pic].

Рис № 12. Трихомонада влагалищная.

I — мазок на культуры, IIмазок з піхви, IIIмазок з піхви (забарвлення метиленовым синім) атрихомонада: 1 ядро, 2 базальні тільця, 3 передні жгутики, 4 ундулирующая мембрана, 5 аксостиль, 6 парабазальная нитку, 7 лейкоцити. в — епітеліальні клетки.

На передньому кінці тіло має 4 джгутика і ундулирующую мембрану, що доходить лише незалежності до середини тіла. Ближче до переднього кінцю розташовується ядро. Крізь її проходить осьова нитку (аксостиль), виступає на задньому кінці в вигляді шипика. Цитоплазма містить вакуолі. Цист не утворює, у зовнішній середовищі швидко гине. Грає помітну роль патології сечостатевої системи, особливо в жінок. Спостерігається та тривалого бессимптомное носійство, частіше чоловіки. Основними симптомами захворювання, яке називається мочеполовым трихомонозом, є сверблячка, біль, печіння, серозногнійні виділення (бели).

Трихомонады цього виду передаються лише статевим шляхом. Іноді висловлюване думка у тому, що трихомонады можуть переселитися у піхву з кишечника, не так, оскільки кишкова і влагалищная трихомонады — це різновиди з різними вимогами до місцевих умов довкілля. Діагноз ставлять для виявлення трихомонад в виділеннях сечостатевих шляхів методом мікроскопії нативных чи забарвлених по Романовському мазков.

Диагностика.

Дослідження виділень сечостатевих путей.

При запальних захворюваннях сечостатевих шляхів обов’язково дослідження на наявність влагалищных трихомонад.

Патологічні виділення в жінок беруть на дослідження з допомогою влагалищных дзеркал і тампона зі слизової оболонки піхви або з його заднього зводу, а попри велику кількість виділень — з зовнішніх статевих органів чи з пальця гумової рукавички після огляду хворий врачом.

З уретри отримують матеріал з допомогою спеціальної ложечки, яку вводять до сфинктера.

У чоловіків до сечовипускання з уретри видавлюють краплю виділень. Для дослідження сечового міхура сечу отримують катетером і микроскопируют осад після його центрифугирования.

В усіх випадках 1—-2 краплі виділень необхідно відразу ж потрапити розмістити у краплю ізотонічного розчину хлориду натрію на матеріальному склі, накрити покровным склом і досліджувати за середнього збільшенні (Х40, х10) з сухий системою. У препараті, приготовленому зазначеним способом, внаслідок швидкого засихання рухливість трихомонад невдовзі припиняється. Тому рекомендують готувати препарат на кшталт «висячої краплі». У получающейся у своїй вологій камері, де, завдяки вазелиновой прокладанні створюється герметичність і сповільнюється висихання препарату, рухливість трихомонад можна спостерігати іноді протягом години. Це дає можливість готувати препарати в процедурному кабінеті і їх до лабораторії (в холодну пору року препарати треба доставляти в утепленому біксі). У нативном препараті трихомонады легко від лейкоцитів та інших клітин рухом, і навіть наявністю джгутів і ундулирующей мембрани. Чіткіше трихомонады видно для дослідження в темному полі бою або при фазовоконтрастної мікроскопії. У несвіжому чи подсохшем мазку трихомонады швидко припиняють свій рух, й у такому випадку їхнє визначення стає практично невозможным.

Для діагностики трихомонадного поразки з досліджуваного матеріалу в процедурному кабінеті готують мазки і скеровують до лабораторії, де з їхніми після подсушивания фіксують і фарбують по Романовскому.

У забарвлених препаратах досить чітко виявляються особливості морфології трихомонад, що з необмеженим часом дослідження (в протилежність нативному мазка, де терміни доставки і мікроскопії обмежені в часі збереження рухливості трихомонад) робить його досить зручним для практичних умов. Забарвлення по Романовському дає кращі результати в модифікації М. А. Цагикян (1954). І тому фіксований тонкий мазок фарбують 40 хв фарбою наступного складу: води дистильованої 100 мл, 1% розчину карбонату натрію 15 крапель та фарби Романовського 4 мл. За наведеною модифікації більш чітко фарбуються жгутики, трихомонады стають помітними. Ядра офарблюються в фиолетово-рубиновый чи фіолетовий колір, цитоплазма—в блакитний, жгутики та інших структурні освіти — в рожево— красный.

Зростанню ефекту лабораторного дослідження сприяє перегляд нативных і забарвлених препаратов.

Список використовуваної литературы.

1. Геніс разом Д. Е. Медична паразитологія, М. «Медицина», 1985 р 2. Воробйов А. А. Мікробіологія і імунологія, М. «Медицина», 1999 р. 3. Коротеев А.І. Медична мікробіологія, імунологія й вірусологія, С;

П., 1998 р. 4. Золотницкий В. С. Керівництво до практичним занять по епідеміології і паразитології, М. «Медицина», 1975 р. 5. Слюсарев А. А. Біологія із загальною генетикою, М. «Медицина», 1978 р. 6. Чернес Ф. К. Мікробіологія, М. «Медицина», 1987 р. 7. Ярыгин В. М. Біологія, М. «Медицина», 1980 г.